畜牧兽医学报

作者：张瑞莉, 张迪, 郭荣, 陈阳, 李广兴, 黄小丹

单位：1. 东北农业大学动物医学院, 哈尔滨 150030;2. 黑龙江省实验动物与比较医学重点实验室, 哈尔滨 150030

关键词：硒缺乏,TLR4,MyD88,NF-κB,胸腺,凋亡

基金：国家自然科学基金青年基金项目（31602028）；黑龙江省博士后基金项目（LBHQ19068）

本试验旨在探讨硒缺乏是否通过激活Toll样受体信号通路诱导鸡胸腺细胞凋亡。复制硒缺乏模型，将200只1日龄健康的肉鸡随机分为对照组（C组）和缺硒组（L组），对照组饲喂硒含量0.2 mg·kg-1的正常日粮，缺硒组饲喂硒含量0.004 mg·kg-1的缺硒日粮。在15、25、35、45、55日龄时，每组分别选取15只鸡，观察胸腺组织病理形态变化和超微结构变化；检测胸腺组织中TLR4信号转导通路与细胞凋亡相关因子的表达。又建立了MDCC-MSB1（MSB1）细胞硒缺乏模型，并在此基础上设立6个分组：对照（C group）组、缺硒（L group）组、缺硒+转染空质粒（L+pCMV-HA-N）组、缺硒+siRNA阴性对照（L+NCsiRNA）组和缺硒+过表达TLR4（L+pCMV-HA-TLR4）组、缺硒+干扰TLR4（L+siChTLR4）组，低硒处理5 d后，检测细胞活力、细胞凋亡情况、TLR4信号转导通路与细胞凋亡相关因子的表达。结果显示：1）与C组相比，L组皮质髓质的淋巴细胞数量减少、细胞排列紊乱、皮质髓质充血、核碎裂，广泛的局灶性坏死。L组鸡胸腺组织淋巴细胞间出现裂隙，体积缩小，细胞碎裂，核染色质边集，线粒体肿胀，嵴断裂。2）与15日龄C组相比，L组鸡胸腺中TLR4、MyD88、NF-κB、Caspase-3、Caspase-9、Bax mRNA和蛋白表达水平在15~55日龄中均显著上调，Bcl-2 mRNA和蛋白表达水平呈相反趋势。3）与C组相比，L组MSB1细胞活力显著下降、细胞凋亡数量明显增加、TLR4、MyD88、NF-κB、Caspase-3、Caspase-9、Bax mRNA和蛋白的表达均显著增加、Bcl-2 mRNA和蛋白表达水平极显著降低；与L组相比，L+siChTLR4组细胞活力明显增强、细胞凋亡数量明显减少、相关因子mRNA和蛋白表达显著下降，而L+pCMV-HA-TLR4组细胞活力明显降低、细胞凋亡数量明显增加、相关因子mRNA和蛋白表达均明显增加。综上所述，硒缺乏通过TLR4/MyD88/NF-κB信号通路介导鸡胸腺细胞凋亡，并进一步诱导鸡胸腺损伤。

来源：2022年第11期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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