畜牧兽医学报

作者：代宇星, 史银银, 温作晨, 罗云燕, 祝雪丽, 郑春婷, 李淑英, 洪亮, 张建斌, 郭亮, 蒲蕾

单位：天津农学院动物科学与动物医学学院 天津市农业动物繁育与健康养殖重点实验室, 天津 300384

关键词：Hlcs基因,siRNA干扰,C2C12细胞,成肌成脂诱导,糖酵解基因

基金：天津市教委科研计划项目（2018KJ188）

旨在研究全羧化酶合成酶（holocarboxylase synthetase，Hlcs）对糖酵解基因表达的影响，为进一步研究细胞糖酵解奠定基础。本试验以C2C12细胞为试验材料，采用siRNA技术干扰Hlcs基因，通过荧光定量PCR和Western blotting检测Hlcs基因干扰对糖酵解基因表达的影响。结果表明，在C2C12细胞分化过程中，Hlcs基因与Pfkm、Pkm、Hk-2基因的表达趋势一致，提示Hlcs基因与糖酵解具有相关性。干扰Hlcs后，细胞分化形成的肌管数量明显少于对照组，糖酵解限速酶Pfkm的mRNA水平显著降低（P<0.05），而显著提高了Pkm的mRNA水平和蛋白表达水平（P<0.05）；生物素作为羧化酶的辅酶，能够显著上调Pkm、Hk-2的mRNA水平（P<0.05）。干扰Hlcs后，细胞分化形成的脂滴数量明显少于对照组，Pfkm的mRNA水平显著升高（P<0.05），且Pkm的mRNA水平和蛋白表达水平显著升高（P<0.05）；生物素的添加能够显著上调Pfkm、Pkm的mRNA水平（P<0.05）。综上所述，在C2C12细胞分化过程中，Hlcs基因与糖酵解基因表达趋势一致，且干扰Hlcs基因可以抑制成肌分化C2C12细胞中Pfkm和Hk-2基因的表达，促进Pkm的表达；而促进成脂分化C2C12细胞中Pfkm和Pkm的表达，抑制Hk-2基因的表达。

来源：2022年第10期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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