畜牧兽医学报

作者：王鹏, 韩海银, 李文韬, 刘子嶷, 储明星, 刘玉芳

单位：1. 河北工程大学生命科学与食品工程学院, 邯郸 056021;2. 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所 农业农村部动物遗传育种与繁殖重点实验室, 北京 100193

关键词：山羊,卵泡发育,颗粒细胞增殖,可变剪接体,WNT4-β

基金：国家自然科学基金（32102509）；财政部和农业农村部：国家现代农业产业技术体系（CARS-38）；中国农业科学院科技创新工程（CAAS-ZDRW202106；ASTIP-IAS13）

旨在研究WNT4的一个可变剪接体（WNT4-β）对山羊卵泡颗粒细胞增殖的影响。本研究选取4~6月龄健康母羊20只，采集双侧卵巢，体外分离卵泡颗粒细胞进行培养。通过免疫荧光染色技术确定WNT4-β的表达位置；在山羊颗粒细胞中过表达或干扰WNT4-β后，利用RT-qPCR、Western blot检测WNT4-β和WNT信号通路中关键标记因子ROA1、RHOA及颗粒细胞增殖标记基因cyclin-D2、CDK4的表达变化；CCK-8技术检测颗粒细胞增殖情况；并通过ELISA分析颗粒细胞中生殖激素水平的变化。免疫荧光染色结果显示，WNT4-β只在山羊卵泡颗粒细胞中表达，在卵母细胞不表达；过表达WNT4-β后，WNT4-β和颗粒细胞增殖因子cyclin-D2、CDK4的mRNA相对表达量极显著增加（P0.05）；干扰WNT4-β后则结果相反，颗粒细胞增殖受到抑制（P<0.05），E2和P4的水平显著降低（P<0.05）。综上所述，WNT4可变剪接体WNT4-β通过调控WNT信号通路促进山羊卵泡颗粒细胞增殖及类固醇激素分泌，本研究为解析WNT4调控山羊颗粒细胞增殖的潜在分子机制提供理论基础。

来源：2022年第10期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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