畜牧兽医学报

作者：杨洋, 谢黎卿, 胡沛, 高丽旭, 袁祥, 李攀, 彭远义, 李能章

单位：西南大学动物医学院, 重庆 400715

关键词：多杀性巴氏杆菌,hyaD,基因缺失株,毒力,交叉保护性

基金：财政部和农业农村部：国家现代农业（肉牛牦牛）产业技术体系资助（CARS-37）；重庆市科技局基础研究及前沿技术研究项目（cstc2017jcyjAX0288）

hyaD为A型多杀性巴氏杆菌荚膜多糖合成相关基因，为探讨该基因对多杀性巴氏杆菌毒力及其免疫保护特性的影响，本研究利用同源重组方法，构建了牛源A型多杀性巴氏杆菌CQ2株（PmCQ2）的hyaD基因缺失株（ΔhyaD）。结果发现，与野生株相比，ΔhyaD的荚膜产生量及其感染后在脏器中的细菌定殖量均显著下降，其毒力显著降低。细胞试验发现，ΔhyaD更易黏附于巨噬细胞，被吞噬数量显著多于野生株，致使巨噬细胞相关炎性因子表达显著上调。hyaD基因的缺失，可调控与荚膜合成、LPS合成转运、铁转运等相关的基因表达显著下调，促使相关保护性抗原基因表达显著上调。以制备的PmCQ2株和ΔhyaD株灭活苗免疫小鼠（加强免疫1次），免疫后第21天分别采用同源和异源多杀性巴氏杆菌攻毒，ΔhyaD株免疫小鼠肺组织感染后24 h无明显或轻微病理损伤，对牛源A型、B型和F型多杀性巴氏杆菌的免疫保护率分别为100%、100%和80%，对兔源、猪源和禽源A型多杀性巴氏杆菌的免疫保护率分别为90%、100%、100%；而野生株PmCQ2除对牛源A型多杀性巴氏杆菌的保护率在80%以上外，对牛源B型和F型及兔、猪、禽源A型多杀性巴氏杆菌均无明显交叉保护作用。研究结果表明，hyaD基因可通过调控荚膜产生及毒力相关因子表达影响菌株毒力；hyaD基因缺失可调控相关交叉保护性抗原表达，赋予菌株交叉免疫保护特性。该研究为多杀性巴氏杆菌通用型疫苗的研发提供了参考。

来源：2022年第10期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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