畜牧兽医学报

作者：徐春林, 曹玉珠, 夏天, 贾其辉, 王丹丹, 郑航, 田亚东, 康相涛, 蒋瑞瑞, 刘小军, 李红

单位：1. 河南农业大学动物科技学院, 郑州 450046;2. 河南省家禽育种国际联合实验室, 郑州 450046;3. 河南省鸡种质资源创新与利用重点实验室, 郑州 450046

关键词：鸡,MTTP,MTTPL,脂质代谢,雌激素,脂蛋白

基金：国家自然科学基金青年基金项目（31902146）；河南省高等学校重点科研项目（21A230011）；河南省高校科技创新团队支持计划（21IRTSTHN022）

旨在探究鸡微粒体甘油三酯转运蛋白样基因（MTTPL）生物学特性及其表达调控机制，为进一步探讨其在鸡肝脂质代谢中的生物学功能奠定基础。本研究首先采用PCR和测序技术，克隆MTTPL cDNA序列；利用在线软件对MTTPL蛋白结构域、三维空间结构及系统进化树进行分析；构建pcDNA3.1-MTTPL-EGFP过表达载体，通过与内质网标签蛋白的表达载体DsRed-λ共转染鸡肝癌细胞系（LMH）细胞，对MTTPL进行亚细胞定位；分别采集不同周龄卢氏绿壳蛋鸡（1日龄、1周龄、10周龄、30周龄每个周龄各8只）组织样，采用荧光定量PCR分析MTTPL基因和鸡微粒体甘油三酯转运蛋白基因（MTTP）的时空表达谱；然后用0.5、1和2 mg·kg-1体重浓度的17 β-雌二醇分别处理海兰褐鸡（每组20只）12和24 h后，分析雌激素对肝MTTPL和MTTP表达的影响；最后用1、50、和100 nmol·L-1 17β-雌二醇及雌激素受体拮抗剂分别处理鸡胚肝原代细胞12 h （每组3个重复），研究雌激素调控MTTPL基因表达的作用机制。结果表明，鸡MTTPL的CDS区全长为2 646 bp，可编码881个氨基酸，与人和鸡MTTP拥有共同的祖先；定位于细胞内质网；鸡MTTPL和MTTP具有与人MTTP相同的功能域，且三维结构相似度偏差较小，分别为0.090和0.064；MTTPL基因在鸡肝和肾组织中高表达，MTTP在鸡肝、肾和小肠中高表达；在肝中，MTTPL和ApoB的表达水平随周龄的增加均显著上升（P0.05）；在17β-雌二醇处理鸡12和24 h时后，MTTPL及ApoB在肝中均显著上调表达（P<0.05），而MTTP在高浓度处理时表达量显著下调（P<0.05），在低浓度时无显著变化；与对照组相比，雌激素可显著上调鸡胚肝原代细胞中ApoB和MTTPL的表达（P<0.05），而MTTP表达水平无显著变化；与雌激素处理组相比，雌激素及受体ERα拮抗剂MPP共处理组MTTPL基因表达水平显著降低（P<0.05）；与MPP和雌激素共处理组相比，ERα和ERβ受体拮抗剂ICI和TAM处理组MTTPL基因表达水平无显著变化。综上所述，鸡MTTPL位于内质网中，具有与人MTTP相似的功能结构域；MTTPL和MTTP均在肝中相对高表达，且MTTPL在产蛋期鸡肝的表达显著高于产蛋前期，而MTTP无显著变化。雌激素可通过与ERα受体结合调控鸡MTTPL的表达，而MTTP不受雌激素调控。表明MTTPL可能在鸡产蛋期肝脂质代谢中发挥重要作用。

来源：2022年第9期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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