畜牧兽医学报

作者：唐紫雯, 程华琴, 刘冬菊, 彭毛卓玛, 杨雪, 李键, 殷实

单位：1. 西南民族大学畜牧兽医学院, 成都 610041;2. 西南民族大学 现代生物技术国家民委重点实验室, 成都 610041

关键词：玉米赤霉烯酮,原花青素,牦牛,颗粒细胞,氧化损伤,雌激素

基金：中央高校基本科研业务费专项基金项目（2021NYB01）；大学生创新创业训练计划项目（S202110656086）

旨在探究原花青素（procyanidins，PC）在玉米赤霉烯酮（zearalenone，ZEA）诱导牦牛颗粒细胞产生氧化损伤后，对颗粒细胞生长增殖、抗氧化性以及激素分泌的影响。本试验选取3～5岁的健康牦牛（n=3），完成卵巢颗粒细胞的分离培养，并通过免疫荧光染色鉴定颗粒细胞纯度。通过CCK-8法分别比较不同浓度ZEA （0（对照组）、5、10、20、40、60、80和100 μmol·mL-1）、不同浓度PC （0（对照组）、0.05、0.5、2.5、5、10、50和100 μg·mL-1）以及50 μmol·mL-1 ZEA+5 μg·mL-1 PC联合处理对牦牛颗粒细胞活性的影响。通过ELISA法检测对照组（未添加ZEA及PC）、50 μmol·mL-1 ZEA组和50 μmol·mL-1ZEA+5 μg·mL-1PC联合处理组牦牛颗粒细胞活性氧（reactive oxygen species，ROS）以及雌二醇（E2）水平。采用实时荧光定量PCR法检测不同组颗粒细胞中部分增殖生长、凋亡、抗氧化及E2合成相关基因的表达水平。结果显示，本研究所分离培养得到的细胞表达颗粒细胞标志蛋白FSHR，具有较高的纯度，可以满足后续试验要求。添加不同浓度ZEA后，颗粒细胞活力随着ZEA浓度的升高而显著降低（P<0.05）。在一定浓度范围内（0~5 μg·mL-1），随着浓度的上升，PC对颗粒细胞的活力有显著提高作用（P<0.05），且在浓度为5 μg·mL-1时对细胞活力的提高作用最明显。与ZEA处理组相比，ZEA与PC联合处理后颗粒细胞的数量增加且细胞活力极显著提高（P<0.05），颗粒细胞增殖生长相关基因PCNA和IGF-Ⅱ 以及抗凋亡相关基因XIAP和BCL-2的表达显著上调（P<0.05）。相反，促凋亡相关基因BAX和CASP3的表达显著下调（P<0.05）。同时，ZEA+PC联合处理后能显著降低牦牛颗粒细胞活性氧水平并促进颗粒细胞分泌E2（P<0.05），颗粒细胞中的抗氧化相关基因SOD2、GPX1及CAT和E2合成相关基因STAR、CYP11A1及HSD3B的表达量显著上调（P<0.05）。上述结果表明，PC可提高经ZEA处理后颗粒细胞的生长增殖能力，上调颗粒细胞的活力，提高抗氧化能力，降低ROS水平以及提高E2的分泌水平。综上所述，PC对ZEA诱导的牦牛颗粒细胞氧化损伤有一定保护作用。本研究为ZEA毒性的防治和畜牧业生产中PC的应用提供了一定的研究数据和理论支持。

来源：2022年第9期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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