畜牧兽医学报

作者：于志瑞, 张旭, 牛莎莎, 邓光存, 吴晓玲

单位：1. 西部特色生物资源保护与利用教育部重点实验室, 银川 750021;2. 宁夏大学生命科学学院, 银川 750021;3. 宁夏医科大学总医院, 银川 750004

关键词：LncRNANR_003508,miR-483-3p,卡介苗,细胞坏死,混合谱系激酶结构域样蛋白

基金：宁夏自然科学基金重点项目（2022AAC02009）；宁夏重点研发计划项目（2018BFH03017）；国家自然科学基金（32060160；82160305）

旨在探讨LncRNA NR_003508在牛分枝杆菌卡介苗（Bacillus Calmette-Guérin，BCG）感染中对小鼠巨噬细胞坏死的调控作用。本研究利用小干扰RNA技术干扰小鼠巨噬细胞系RAW264.7中LncRNA NR_003508的表达，并结合BCG感染，采用Western blot、免疫荧光和流式细胞术等技术检测坏死相关调控因子混合谱系激酶结构域样蛋白（MLKL）的表达水平和细胞坏死率，以及通过生物信息学和双荧光素酶报告基因技术分别预测和验证LncRNA NR_003508与miR-483-3p的靶向结合。结果表明，BCG感染巨噬细胞后，LncRNA NR_003508表达水平显著上调（P<0.01）；转染siRNA-LncRNA NR_003508后，MLKL蛋白表达显著下调（P<0.01），同时巨噬细胞坏死率也显著降低（P<0.05）；LncRNA NR_003508可以与miR-483-3p特异性结合并发挥海绵吸附作用，并且干扰LncRNA NR_003508可显著上调miR-483-3p的表达（P<0.01），而过表达miR-483-3p显著抑制MLKL的表达（P<0.01），同时抑制巨噬细胞坏死。以上研究结果表明，LncRNA NR_003508通过海绵吸附miR-483-3p并靶向MLKL的表达来促进BCG诱导的巨噬细胞坏死。

来源：2022年第9期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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