畜牧兽医学报

作者：任宇, 燕文荃, 丁玥竹, 扈孟雪, 周杰珑, 吴培福, 陈粉粉, 刘莉莉

单位：西南林业大学生命科学学院, 昆明 650224

关键词：VPS28,乳蛋白,泛素化,RNAi,iTRAQ

基金：国家自然科学基金（31902152）；云南省教育厅科学研究基金研究生项目（2021Y267）；云南省教育厅科学研究基金教师项目（2018JS333）；西南林业大学博士科研启动基金（112119）；云南省科技厅基础研究项目（2019FD06）

旨在分析VPS28基因调控乳蛋白合成的分子机制，为奶牛泌乳性状的分子育种奠定理论基础。本研究首先利用RNA干扰（RNA interference，RNAi）技术敲降奶牛原代乳腺上皮细胞（bovine mammary epithelial cells，BMECs）中VPS28基因的表达水平，检测与乳蛋白合成、泛素化-溶酶体和泛素化-蛋白酶体通路相关的11个基因、泛素蛋白的表达水平及蛋白酶体活性；然后抑制BMECs中蛋白酶体和溶酶体的活性，检测酪蛋白相关基因、核糖体蛋白的表达水平；最后利用同位素标记相对和绝对定量（isobaric tags for relative and absolute quantification，iTRAQ）比较蛋白质组学分析敲降前后BMECs的差异表达蛋白。结果表明，敲降VPS28基因后，CSN1S1、CSN2、CSN3、RPS8、UBC、PSMC3、PSMC5基因均显著上调，PSMD12显著下调；抑制蛋白酶体后，CSN1S1、CSN2、CSN3显著上调，RPL13显著下调；抑制溶酶体活性后酪蛋白相关基因表达不显著；iTRAQ结果共筛选出129个差异表达蛋白，下调蛋白主要富集在核糖体、溶酶体、剪切体等相关通路，上调蛋白主要富集在内质网的蛋白质加工、加压素调控的水重吸收过程、RNA转运等通路中。研究表明，VPS28基因可通过泛素化信号通路影响BMECs中乳蛋白的合成。

来源：2022年第8期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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