畜牧兽医学报

作者：汤荣锋, 范前进, 郭龙军, 张鑫, 石达, 时洪艳, 陈建飞, 冯力

单位：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所, 兽医生物技术国家重点实验室/猪消化道传染病创新团队, 哈尔滨 150069

关键词：猪丁型冠状病毒,S1-CTD蛋白,相互作用,KIFBP

基金：黑龙江省科学基金项目(TD2020C002)；兽医生物技术国家重点实验室自主研究课题(SKLVBP202105)

猪丁型冠状病毒纤突蛋白S1亚基C端结合域(S1-CTD)是诱导中和抗体产生的主要区域，为研究与其相互作用的宿主蛋白，采用HEK-293T真核表达系统表达并纯化了S1-CTD，提取了猪回肠上皮细胞膜蛋白，通过免疫共沉淀筛选了可能与S1-CTD相互作用的蛋白并进行质谱分析，发现32个疑似相互作用的宿主蛋白。构建其中可能与S1-CTD互作的蛋白KIF1 binding protein (KIFBP)的真核表达质粒，通过免疫共沉淀和激光共聚焦验证上述宿主蛋白与S1-CTD是否存在相互作用，结果表明KIFBP和S1-CTD之间存在相互作用，共同转染时在细胞质共定位。进一步研究表明，过表达KIFBP能够有效降低病毒RNA水平和病毒滴度，其中mRNA水平降低了约70%，病毒滴度降低了101.6TCID50。综上，本研究筛选并鉴定出一种与PDCoV S1-CTD相互作用的宿主蛋白KIFBP，为了解PDCoV的致病机制提供了理论基础。

来源：2022年第7期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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