畜牧兽医学报

作者：刘珂含, 王永, 李艳艳, 王重洋, 朱江江, 熊燕, 李安, 林亚秋

单位：1. 西南民族大学畜牧兽医学院，成都 610041;2. 青藏高原动物遗传资源保护与 利用教育部/四川省重点实验室，成都 610041

关键词：山羊,SRSF10,基因克隆,表达特性,肌内前体脂肪细胞,细胞分化

基金：国家自然科学基金(32072723;31902154);西南民族大学研究生创新创业项目(CX2021SZ69)

旨在克隆山羊SRSF10基因序列，明确其生物学特性，并通过过表达和干扰手段阐明SRSF10对山羊肌内脂肪细胞分化的影响。本研究以简州大耳羊(Capra hircus)为试验对象，利用RT-PCR技术克隆山羊SRSF10基因序列，并进行生物信息学分析; 利用实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR，qPCR)技术研究其在成脂诱导分化不同阶段细胞中的表达水平; 转染pcDNA3.1-SRSF10过表达载体和SRSF10-siRNA至山羊肌内前体脂肪细胞并诱导分化，通过油红O和Bodipy染色法从形态学上明确其对脂滴积聚的影响; 通过qPCR方法检测脂肪细胞分化标志基因表达的变化。结果显示，获得山羊SRSF10基因序列为1 026 bp，其中CDS区552 bp，共编码183个氨基酸; SRSF10在诱导分化96 h的肌内脂肪细胞中表达量最高; 过表达和干扰山羊SRSF10分别促进和抑制了肌内脂肪细胞中的脂滴积聚; 过表达后基因SREBP1、PPARγ和C/EBPα的相对表达量极显著上调(P < 0.01)，干扰后分化标志基因SREBP1、PPARγ和C/EBPα相对表达水平极显著降低(P < 0.01)。结果表明，山羊SRSF10是肌内脂肪细胞分化的正调控作用因子，并且这种调控作用可能主要通过调节SREBP1、PPARγ和C/EBPα的表达来实现。

来源：2022年第6期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

查看畜牧兽医学报杂志2022年第6期