畜牧兽医学报

作者：李天昊, 赵学慧, 宋晨, 委慧玲, 齐玉梅, 田常青, 祁国军, 史文静, 苟惠天, 薛慧文

单位：甘肃农业大学动物医学院, 兰州 730070

关键词：产单核细胞李氏杆菌,噬菌体,分离,鉴定

基金：国家自然科学基金(32060822;31960726;31560700)；甘肃省重点研发-农业(20YF8FA136)；国家重点研发计划(2019YFC1605705-2)；甘肃农业大学青年导师基金(GAU-QDFC-2020-010)；甘肃省优秀研究生“创新之星”项目(2021CXZX-390)

本研究旨在获得天然李氏杆菌噬菌体，提供防治李氏杆菌病新型生物制剂，减少抗微生物药物的使用，抑制病原菌耐药性的产生。利用产单核细胞李氏杆菌作为宿主菌对屠宰场污水进行双层琼脂平板法筛选，获得噬菌体，并对其进行透射电镜观察、生长特性检测(温度、pH、一步生长曲线、最佳感染复数、有机溶剂影响)、基因组酶切鉴定和全基因组测序分析。分离出的产单核细胞李氏杆菌噬菌体中，选取1株裂解性强，遗传稳定的噬菌体进行后续试验，并命名为LP8；经电镜观察为肌尾科噬菌体，可以跨种裂解18株产单核细胞李氏杆菌和5株威尔斯李氏杆菌，确定LP8的最佳感染复数为1、最适生长温度为45 ℃、最适pH为7；在6种有机溶剂中，仅异戊醇可导致LP8活性丧失；对提取的基因组进行酶切鉴定，确定为双链DNA；LP8全基因组测序结果表明，基因组大小为87 038 bp、含有120个编码基因、编码基因的累计长度为76 326 bp、编码基因的平均长度为636 bp、编码区域长度占基因组的比例为87.69%。本试验分离出产单核细胞李氏杆菌噬菌体，并对其噬菌能力和应用价值进行鉴定。分离出的LP8噬菌体相较于李氏杆菌的噬菌体，细菌裂解能力更强，适应环境范围更广。本研究为实验室后续建立产单核细胞李氏杆菌噬菌体库和产单核细胞李氏杆菌噬菌体的其他应用提供了良好的基础。

来源：2022年第5期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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