畜牧兽医学报

作者：杨成迎, 林海烂, 黄子晴, 王乃秀, 汪锴, 甘玲

单位：1. 西南大学动物医学院, 重庆 402460;2. 重庆市兽医工程研究中心, 重庆 402460

关键词：神经肽,海马神经元,氧化应激,BDNF/trkB,凋亡信号通路

基金：重庆市留创基金项目(cx2018096)；中央高校基本科研业务专项基金(XDJK2020B014)；重庆市生猪产业技术体系创新团队资助项目

旨在研究外源性神经肽可卡因-苯丙胺调节转录因子(cocaine-and amphetamine-regulated transcript,CART)抵抗海马神经元氧化应激的效果及机制。本研究取初生24 h内大鼠海马进行神经元的原代培养，经纯度检测后，用200 μmol·mL-1过氧化氢诱导以构建氧化应激模型。在此基础上，分析CART对神经元活率、ATP含量、线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,MMP)和凋亡通路相关基因以及trkB基因表达的影响，并对trkB基因与凋亡相关蛋白和基因的表达进行相关性分析。结果显示，与对照组相比，H2O2组中的神经元活率及ATP含量极显著降低(P<0.01)，MMP值显著降低(P<0.05)；与H2O2组相比，添加不同浓度的CART使海马神经元活率、ATP含量和MMP值显著增加(P<0.05)。与对照组相比，H2O2组中bax、caspase-3的mRNA水平极显著增加(P<0.01)，bcl-2(P<0.01)、trkB(P<0.05)的mRNA水平分别极显著和显著降低；与H2O2组相比，CART+H2O2组中bcl-2的mRNA水平极显著升高(P<0.01)，而trkB的mRNA水平显著升高(P<0.05)，同时bax的mRNA水平显著降低(P<0.05)，而caspase-3的mRNA水平则极显著降低(P<0.01)。Western blot分析结果显示，与对照组相比，H2O2组中bax、caspase-3的蛋白质水平显著升高(p<0.05)，bcl-2、trkB的蛋白质水平显著降低(P<0.05)；与H2O2组相比，CART+H2O2组中bcl-2、trkB的蛋白质水平显著升高(P<0.05)，而bax、caspase-3的蛋白质水平显著降低(P<0.05)。相关性分析结果显示，trkB基因与bax、caspase-3基因的表达呈显著负相关，而与bcl-2基因的表达呈显著正相关。结果提示，CART在增加氧化应激海马神经元中trkB基因表达水平的同时，可通过削弱凋亡信号通路抵抗海马神经元氧化应激。

来源：2022年第4期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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