畜牧兽医学报

作者：尹德晶, 吴燕, 岳筠, 杨鹏, 陈静, 王慧, 张双翔, 王开功, 程振涛

单位：1. 贵州大学动物科学学院, 贵阳 550025;2. 贵州省动物疫病与兽医公共卫生重点实验室, 贵阳 550025;3. 贵州省动物疫病预防控制中心, 贵阳 550008

关键词：丝状支原体山羊亚种,LppA蛋白,DNA疫苗,免疫效果

基金：国家自然科学基金项目(31660723);国家自然科学基金项目(32060786);贵州省科技计划项目(黔科合基础[2019]1181号);贵州省科技计划项目(黔科合支撑[2021]一般161号);贵州省动物疫病预防控制中心人才基地建设项目(黔疫控[2019]06号)

基于丝状支原体山羊亚种(Mycoplasma mycoides subsp.capri, Mmc)贵州株的LppA蛋白N末端基因,构建真核重组表达质粒pVAX1-LppA,并对免疫效果进行分析,为防控羊支原体肺炎提供新思路。以构建的真核重组表达质粒pVAX1-LppA(50、100、150 μg)、pVAX1空载体、无菌PBS分别免疫小鼠。通过ELISA方法检测小鼠血清中抗体和细胞因子(IL-2、IFN-γ、IL-4)水平,MTT法检测脾淋巴细胞增殖情况,流式细胞术检测CD4+、CD8+ T淋巴细胞占总细胞数比例的变化,攻毒试验评估对小鼠的保护效率,并采集小鼠肺制备切片以观察病理变化。结果显示:与空载体pVAX1组及PBS对照组相比,重组质粒pVAX1-LppA组小鼠体内的抗体和细胞因子(IL-2、IFN-γ、IL-4)水平显著升高,脾细胞增殖能力更强,CD4+、CD8+ T淋巴细胞占总细胞数的比例显著增多,对小鼠具有一定的攻毒保护能力,肺部病理损伤明显减轻,发病动物数量减少,其中100 μg的重组质粒pVAX1-LppA保护率最高,为80%。综上表明,LppA蛋白具有良好的免疫原性,重组质粒pVAX1-LppA能激活强烈的体液免疫和细胞免疫应答,可作为羊支原体肺炎的候选疫苗。

来源：2022年第3期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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