畜牧兽医学报

作者：于永乐, 姚延珠, 韩先杰, 张传美, 秦志华, 杨瑞梅, 张洪亮, 刘维全, 单虎

单位：1. 青岛农业大学动物医学院 山东省预防兽医学重点实验室, 青岛 266109;2. 青岛农业大学植物医学学院, 青岛 266109;3. 中国农业大学生物学院 农业生物技术国家重点实验室, 北京 100193

关键词：犬源牛犬细小病毒,犬圆环病毒,二联PCR

基金：在青高校服务青岛重点学科(兽医学)(025/1119002);"十三五"国家重点研发计划资助项目(2016YFD0501001;2016YFD0501004);青岛农业大学高层次人才科研基金(1120015/663)

本研究旨在建立可同时检测犬源牛犬细小病毒(CBoV)和犬圆环病毒(CCV)的二联PCR检测方法,并对两种病毒病当前的流行情况进行监测和调查。分别将已发表的CBoV和CCV基因组序列进行同源性比对,选择高同源区段,应用Primer Primier 5计算机软件设计并合成了2对特异性扩增引物,目的片段大小分别为170 bp (CBoV)和239 bp (CCV)。分别提取CBoV和CCV重组质粒作为模板,进行二联PCR扩增试验。结果表明,本研究成功建立了可同时检测CBoV和CCV的二联PCR检测方法。并对其重复性、特异性和灵敏度进行验证,二联PCR最低检测限度为3.0 pg总DNA,而对犬细小病毒2型、犬瘟热病毒和犬副流感病毒的PCR检测结果均为阴性。对送检的30份病料进行检测,其中,4份为CBoV阳性,3份为CCV阳性,未检测到混合感染。综上所述,本研究所建立的CBoV和CCV二联PCR诊断方法特异性高,敏感性好,可用于临床犬腹泻病的流行病学调查。

来源：2022年第3期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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