畜牧兽医学报

作者：王微, 华敏, 张芸, 李涛, 张黔东, 袁阳, 程振涛, 文明

单位：1. 贵州大学动物科学学院, 贵阳 550025;2. 贵州省畜禽遗传资源管理站, 贵阳 550025;3. 贵州省动物预防控制中心, 贵阳 550025;4. 贵州省动物生物制品工程技术研究中心, 贵阳 550025

关键词：鸭病毒性肠炎病毒,DEV,RNA干扰,cofilin2

基金：国家自然科学基金项目(31260607;31560703);贵州省百层次创新型人才项目(黔科合人才[2016]4009号);贵州省科技平台及人才团队计划项目(黔科合平台人才[2018]5253号)

旨在探讨cofilin2基因的表达在鸭病毒性肠炎病毒(DEV)增殖过程中的影响。本研究通过已获得的鸭源cofilin2全基因序列(GenBank登录号:MF434775),设计出4对shRNA序列,插入载体中,并转染到鸭胚成纤维细胞中,经FQ-PCR方法和荧光显微镜观察筛选出具有较高干扰效率的shRNA序列,用干扰效率较高的shRNA序列转染到鸭胚成纤维细胞中抑制cofilin2基因的表达,再检测cofilin2在DEV复制过程中表达情况。结果显示:4对shRNA干扰质粒经转染至鸭胚成纤维细胞后,经荧光显微镜观察,构建的4对shRNA干扰质粒均成功转染并得到表达;4对干扰质粒沉默率分别为4.96%±0.78%、41.12%±2.94%、17.55%±2.07%、54.02%±1.73%,以cofilin2-86的沉默效率最高;cofilin2-86转染到鸭胚成纤维细胞,经DEV感染不同时间,其DEV核酸表达量明显下降。综上所述,靶向cofilin2基因RNA干扰在DEV复制和增殖过程发挥重要作用。

来源：2022年第3期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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