畜牧兽医学报

作者：闵星宇, 杨丽雪, 于海玲, 胡宇磊, 杨满珍, 杨璐瑜, 李键, 熊显荣

单位：1. 西南民族大学畜牧兽医学院, 成都 610041;2. 青藏高原动物遗传育种资源保护与利用国家教育部重点实验室, 成都 610041;3. 动物科学国家民委重点实验室, 成都 610041

关键词：犏牛,PPP1R11,基因克隆,基因表达,减数分裂,睾丸发育

基金：四川省科技厅重点研发计划（2021YFN0121）；西南民族大学中央高校基本科研业务专项（2021PTJS26）

旨在克隆犏牛蛋白磷酸酶1调节亚基11（protein phosphatase 1 regulatory subunit 11，PPP1R11）基因，分析其在不同发育阶段睾丸中的表达与定位，为解析其在雄性生殖中的功能机制提供理论依据。本研究采集成年犏牛睾丸、附睾、心、肝、脾、肺、肾、大肠、小肠、胃、肌肉和脂肪组织（n=3），犏牛和牦牛在胎牛时期（5~6月龄）、幼年时期（1~2岁）和成年时期（3~4岁）睾丸（n=3）作为试验材料。通过RT-PCR技术克隆犏牛PPP1R11基因并进行生物信息学分析，采用实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR，qRT-PCR）构建PPP1R11基因在犏牛不同组织中的表达谱，比较分析PPP1R11在犏牛和牦牛不同时期睾丸中的表达，利用免疫组织化学（immunohistochemistry，IHC）技术检测PPP1R11蛋白的细胞定位和表达。结果显示，犏牛PPP1R11基因CDS区为324 bp，编码107个氨基酸，犏牛PPP1R11蛋白与其他哺乳动物同源性较高；PPP1R11可与PPP1R2、PPP1R7、PPP1CB和UTP20等蛋白相互作用，互作蛋白功能主要与蛋白质的磷酸化相关，参与调控睾丸发育、精子发生和性成熟等生物学过程。PPP1R11在犏牛组织中广泛表达，其中在睾丸组织中的表达量最高，相对表达水平极显著高于其它组织（P<0.01）；该基因在犏牛睾丸中的表达量随年龄增长呈上升趋势，幼年和成年时期犏牛睾丸中PPP1R11的表达与同时期牦牛相比差异极显著（P<0.01）；IHC染色结果发现，PPP1R11蛋白在犏牛精原细胞和支持细胞中低表达并与牦牛存在显著差异，雄性犏牛初级精母细胞数量减少并且减数分裂阻滞于此。本研究表明，犏牛与牦牛PPP1R11在睾丸中存在时空表达差异，提示该基因可能与犏牛雄性不育相关，其具体作用机制有待进一步研究。

来源：2022年第2期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

查看畜牧兽医学报杂志2022年第2期