畜牧兽医学报

作者：孙吉, 岳华, 汤承

单位：1. 西南民族大学畜牧兽医学院, 成都 610041;2. 青藏高原动物遗传资源保护与利用教育部重点实验室, 成都 610041

关键词：牛A群轮状病毒,牛冠状病毒,牛病毒性腹泻病毒,牛诺瓦病毒,牛纽布病毒,多重RT-PCR

基金：国家农业产业技术体系四川肉牛创新团队专项（SCCXTD-2020-13）；西南民族大学新发动物疫病研究创新团队（2020NTD02）；西南民族大学动物医学实验室平台建设项目（2020PTJS29）

牛A群轮状病毒（BRVA）、牛冠状病毒（BCoV）、牛病毒性腹泻病毒（BVDV）、牛诺瓦病毒（BNoV）和牛纽布病毒（BNeV）是引起犊牛腹泻的常见病毒，且临床上多存在混合感染的情况。本试验的目的是建立可以同时检测上述5种病毒的多重PCR方法。通过设计引物，优化反应体系和条件，成功建立了可同时检测BRVA、BCoV、BVDV、BNoV和BNeV的多重PCR方法。该方法只特异性检出目标病毒，而对牛星状病毒、牛嵴病毒、牛细小病毒、产肠毒素大肠杆菌、沙门菌和空肠弯曲杆菌等腹泻病原均无扩增，具有良好的特异性和稳定性。对BRVA、BCoV、BVDV、BNoV、BNeV的最低检测下限分别为1.63×105、2.0×106、1.9×105、1.96×105和2.0×105copies·μL-1。比较试验表明，该多重RT-PCR方法与检测单一病毒的RT-PCR方法的符合率为100%。利用该方法对2019—2020年采集自川西北草原的220份牦牛腹泻样本的检测结果表明，BRV的检出率为40.5%、BNoV的检出率为5.9%、BNeV的检出率为4.5%，而BVDV和BCoV无检出。本研究建立的多重RT-PCR方法可同时检测犊牛腹泻粪便样品中的5种常见腹泻病毒，为牛腹泻的快速诊断提供了技术支持。

来源：2022年第1期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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