畜牧兽医学报

作者：席静, 王月丽, 邓肖玉, 杨琴, 李培东, 张江伟, 孙天浩, 朱良全, 易继海, 陈创夫

单位：1. 石河子大学动物科技学院, 石河子 832000;2. 人兽共患传染性疾病防治协同创新中心, 石河子 832000;3. 中国兽医药品监察所, 北京 100081

关键词：布鲁氏菌,巨噬细胞极化,STAT6信号通路,胞内存活

基金：石河子大学高层次人才科研启动项目（RCZD02040）；动物疾病防控兵团重点实验室开放基金（2020BTDJ02）；国家自然科学基金项目（U1803236；32002245）

旨在探讨STAT6介导的巨噬细胞极化对布鲁氏菌胞内生存的影响。本研究采用布鲁氏菌光滑株S2308（S2308）和粗糙型疫苗株RB51（RB51）侵染巨噬细胞。利用qRT-PCR检测M1型巨噬细胞标志因子p65、NOS2和IL-1β，M2型巨噬细胞标志因子STAT6、ARG1、IL-10的mRNA表达水平；流式细胞术检测M1型标记分子CD86和M2型标记分子CD206的表达；Western blot检测p-STAT6蛋白及抑制剂AS对蛋白的抑制作用；ELISA检测M1型细胞因子TNF-α、IL-12和M2型细胞因子IL-4、IL-10的表达量；最后对胞内菌落进行CFU计数。qRT-PCR结果显示，在感染8、12 h时可显著诱导M1型因子mRNA转录表达，72 h时低表达，而M2型因子在72 h时高表达；流式细胞术结果显示，S2308感染12 h可显著诱导CD86的表达，感染72 h可显著诱导CD206的表达，但RB51对二者无影响；Western blot结果显示，S2308菌株在感染72 h时激活STAT6信号通路，而RB51几乎不激活该通路，抑制剂AS在2 μmol·L-1浓度时抑制效果最佳；ELISA结果显示，AS抑制剂可显著抑制IL-4、IL-10的释放，并促进TNF-α、IL-12的释放；CFU计数结果显示，S2308组的胞内菌呈先降低后显著上升趋势，加入AS抑制剂后可显著抑制布鲁氏菌胞内复制。布鲁氏菌S2308在感染后期能够通过STAT6诱导M1型巨噬细胞向M2型转化，并促进Th2型细胞因子的释放，从而有利于布鲁氏菌的胞内生存。而RB51几乎不激活该通路，不影响胞内生存。

来源：2022年第1期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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