畜牧兽医学报

作者：田小欢, 刘茹, 孙艳, 任瑞敏, 余梅, 赵书红, 曹建华

单位：1. 华中农业大学 农业动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室, 武汉 430070;2. 华中农业大学 农业农村部猪遗传育种重点实验室, 武汉 430070;3. 华中农业大学 生猪健康养殖协同创新中心, 武汉 430070

关键词：RNAPolⅡ,单克隆抗体,猪,杂交瘤细胞

基金：国家自然科学基金（31772563）；武汉市应用基础前沿项目（2020020601012255）

旨在制备猪RNA聚合酶Ⅱ的单克隆抗体并进行初步应用。本研究采用生物信息方法预测免疫原，将其化学合成后免疫5只4~8周龄Bal b/c雌性小鼠，对免疫后呈现阳性的小鼠进行细胞融合试验，取其脾细胞与骨髓瘤细胞进行融合并获得能稳定分泌抗RNA PolⅡ的杂交瘤细胞。鉴定结果显示，RNA PolⅡ单克隆抗体的重链为IgG 2A型，轻链为Kappa型。利用间接ELISA方法对杂交瘤细胞进行筛选和亚克隆，获得了8株稳定分泌RNA PolⅡ单克隆抗体的杂交瘤细胞株。将其初步应用到染色质免疫共沉淀（ChIP-seq）技术，并与商业化抗体的富集性进行比较，结果表明，本研究得到的单克隆抗体富集性更强。本研究获得的猪RNA PolⅡ单克隆抗体可为表观遗传学的研究提供理论基础，并且提供重要的生物学材料。

来源：2021年第10期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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