畜牧兽医学报

作者：张克山, 高广亮, 李琴, 赵献芝, 李静, 王启贵

单位：1. 重庆市畜牧科学院, 重庆 402460;2. 重庆市肉鹅遗传改良工程技术研究中心, 重庆 402460

关键词：NPFFR1基因,鹅,卵泡等级发育,性激素,细胞凋亡,周期节律基因

基金：重庆市自然科学基金面上项目（cstc2019jcyj-msxmX0065）；重庆市科研院所绩效激励引导专项（19535）；“重庆英才计划”鹅遗传育种科研创新团队（CQYC20200309103）；财政部和农业农村部：国家现代农业产业技术体系资助（CARS-42-51）

神经相关肽受体（RFamide-related peptide receptor，NPFFR1）是促性腺激素抑制激素的主要亲和受体，它在调控动物繁殖方面起着重要作用。为了解NPFFR1对鹅卵巢卵泡发育的作用，本研究以42周龄健康产蛋四川白鹅为试验材料（n=9），利用RT-qPCR法检测NPFFR1基因在等级前和等级卵泡颗粒细胞中的mRNA表达规律；在颗粒细胞中过表达NPFFR1基因，酶联免疫吸附法检测颗粒细胞上清液（n=9）中雌二醇（estradiol，E2）、孕酮（progesterone，P4）和抗缪勒管激素（anti-Mullerian hormone，AMH）的浓度变化，剩余贴壁细胞作一步法TUNEL检测细胞凋亡情况；转录组测序方法筛选大黄卵泡（8~10 mm）颗粒细胞过表达NPFFR1前后表达差异显著基因，并对差异表达基因进行功能聚类分析。结果显示，除F1等级外，其余等级卵泡颗粒细胞NPFFR1表达量均极显著高于等级前卵泡（P0.05）；转录组测序共筛选到267个差异表达基因（119个下调，148个上调），这些基因主要富集在生物节律过程、繁殖进程等生物学过程中；同时，与对照组相比，差异基因AMH显著下调表达（P<0.05），Clock（clock circadian regulator）、FOS（proto-oncogene，AP-1 trans-cription factor subunit）、Per（period circadian regulator）和ANTXR2（cell adhesion molecule 2）分别极显著（P<0.01）或显著（P<0.05）上调表达。上述试验结果提示，NPFFR1可从激素、细胞凋亡和生物节律等多个环节影响卵泡颗粒细胞，参与调控卵泡的时序等级发育。

来源：2021年第10期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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