畜牧兽医学报

作者：孙欢, 孙克佳, 姜晓龙, 刘爱菊, 马晓菲, 韩红叶, 姚大为, 马毅, 田树军

单位：1. 河北农业大学动物科技学院, 保定 071001;2. 天津市畜牧兽医研究所, 天津 300381;3. 河北省牛羊胚胎技术创新中心, 保定 071001

关键词：脱氧雪腐烯醇,牛,卵母细胞,体外成熟

基金：河北省重点研发计划（19226635D）；天津市奶牛产业岗位技术体系（ITTCRS2017000）

本试验旨在探究脱氧雪腐烯醇（DON）对牛卵母细胞体外成熟发育的影响及其作用机制。将牛卵丘卵母细胞复合体分别在含DON浓度为0、50、250、500、1 000 ng·mL-1的体外成熟培养液中进行体外成熟，检测卵丘细胞扩展程度及第一极体排出率，构建DON毒性模型。然后，借助此模型研究DON对卵母细胞的线粒体分布及后续受精卵裂率、囊胚发育率的影响，探究DON对牛卵母细胞体外成熟及后续发育能力的影响；通过检测体外成熟卵母细胞内的氧化相关因子（ROS、GSH）水平和抗氧化基因CAT、GPx4的mRNA表达量，揭示DON影响牛卵母细胞体外发育能力的分子机制。结果表明，250、500 ng·mL-1的DON显著抑制卵母细胞的第一极体排出（P<0.05），1 000 ng·mL-1的DON极显著抑制第一极体排出（P<0.01）； 250 ng·mL-1的DON显著抑制卵丘卵母细胞扩展（P<0.05），500、1 000 ng·mL-1的DON极显著抑制卵丘细胞扩展（P<0.01）；后续试验选取DON浓度为500 ng·mL-1作为毒性模型（DON组），与不含DON组（对照组）进行比较研究，结果发现，对照组与DON组的线粒体均匀分布比例（60.2%vs.40.0%）存在显著差异（P<0.05）；试验组较对照组的受精卵裂率（33.6±3.6%vs.（67.7±2.6）%）及早期囊胚率（（0.0±0.0）%vs.（18.3±2.2）%）均显著降低（P<0.05）；试验组较对照组，卵母细胞内ROS水平（1.6 vs.1.0）显著升高（P<0.05），GSH相对水平（0.4 vs.1.0）显著降低（P<0.05），抗氧化基因CAT与GPx4的mRNA相对表达量（0.0 vs.1.0；0.6 vs.1.0）显著降低（P<0.05）。以上研究表明，DON对卵母细胞的体外成熟及早期胚胎发育具有抑制作用，其作用机制与DON破坏牛卵母细胞内抗氧化系统平衡相关。

来源：2021年第9期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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