畜牧兽医学报

作者：骆佳, 徐金瑞, 李武, 王玉炯

单位：1. 西部特色资源保护与利用教育部重点实验室, 银川 750021;2. 宁夏大学生命科学学院, 银川 750021

关键词：BCG,FAO,RAW264.7巨噬细胞,细胞自噬,炎性反应

基金：国家自然科学基金项目（31772710；32060799；31760733）；宁夏回族自治区重点研发计划项目（2017BN04）

旨在探究脂肪酸氧化（fatty acid oxidation，FAO）对BCG介导的RAW264.7细胞自噬和促炎因子表达的调控作用。用BODIPY染色和游离脂肪酸定量试剂盒检测BCG感染后RAW264.7细胞中脂滴聚集情况以及脂肪酸含量；Western blot检测BCG感染对肉毒碱棕榈酰基转移酶1A （CPT-1A）表达的影响；Etomoxir （100 μmol·L-1）预处理细胞2 h后，BCG感染细胞6 h，检测RAW264.7细胞中BCG存留量，并用Western blot方法检测自噬相关蛋白（Beclin1、LC3-II）和溶酶体蛋白（Rab7）的表达情况；用免疫荧光方法和mRFP-GFP-LC3荧光双标腺病毒分别检测自噬小体聚集和自噬流；荧光定量PCR和ELISA分别检测促炎因子IL-1β、IL-6和TNF-α mRNA表达情况以及在细胞培养上清中的含量。结果显示，BCG感染促进RAW264.7细胞中脂滴聚集和CPT-1A的表达，而游离脂肪酸含量降低；Etomoxir预处理抑制了细胞中BCG存活，并上调了Beclin1、LC3-II和Rab7表达，且细胞中出现大量自噬小体聚集，自噬流增强，却抑制了促炎因子IL-1β、IL-6和TNF-α mRNA表达与分泌。综上表明，抑制FAO可促进BCG感染诱导的RAW264.7细胞自噬，并抑制BCG感染引起的炎症反应。

来源：2021年第9期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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