畜牧兽医学报

作者：黄诚彧, 徐德全, 冯哲, 周玲, 刘敏

单位：1. 华中农业大学动物医学院, 武汉 430070;2. 农业部猪遗传育种重点开放实验室, 武汉 430070;3. 农业动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室, 武汉 430070

关键词：精原干细胞,分离鉴定,褪黑素,氧化损伤,细胞活力,细胞凋亡

基金：中央高校基本科研业务费专项资金（2662020DKPY003）；国家科技重大专项（2016ZX08006002）；湖北省农业科技创新行动项目（2018skjcx01）

旨在研究褪黑素（melatonin，MT）对体外培养猪精原干细胞（spermatogonial stem cells，SSCs）的作用机制。本研究采集3头7日龄健康大白公猪睾丸，利用差速贴壁法获得SSCs。后经形态学观察、碱性磷酸酶染色、标记基因检测及免疫荧光染色鉴定后以SSCs作为试验材料，设置MT浓度梯度（0、50、250、500、1 000 μmol·mL-1）组处理SSCs，每组设3个重复（n=3），空白对照组加入0.1% DMSO处理，分别检测添加MT后猪SSCs的细胞活力、活性氧（reactive oxygen species，ROS）水平、谷胱甘肽（glutathione，GSH）含量及凋亡基因表达变化。结果显示：1）分离的克隆团细胞具有SSCs的生长特性，可被碱性磷酸酶染色并表达干细胞标志基因OCT4、SOX2和SSCs标志基因NANOG、PLZF、UCHL1；2）50 μmol·mL-1以上的MT在处理48 h后可显著提高SSCs的细胞活力（P<0.05）；3） MT可显著降低猪SSCs内ROS水平（P<0.05），极显著增加细胞内GSH含量（P<0.01）；4） MT可显著抑制猪SSCs内凋亡蛋白Bax和Caspase3的表达（P<0.05）。MT具有清除猪SSCs中的ROS，提高总GSH含量，抑制凋亡基因表达进而提高细胞活力的作用，可为养殖过程中提高公猪繁殖性能提供参考。

来源：2021年第7期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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