畜牧兽医学报

作者：王素华, 王忠才, 黄凌哲, 莫虹斐, 吴绍强, 吕继洲, 赵治国, 帅江冰

单位：1. 温州海关综合技术服务中心, 温州 325027;2. 杭州海关技术中心, 杭州 310012;3. 中国检验检疫科学研究院动物检疫所, 北京 100029;4. 呼和浩特海关技术中心, 呼和浩特 010020

关键词：反刍动物埃立克体,pCS20基因,TaqMan荧光定量PCR,EvaGreen荧光定量PCR

基金：浙江省自然科学基金项目（LGN19C180001）；海关总署科技计划项目（2020HK156）

为快速、准确地检测反刍动物埃立克体，本研究以反刍动物埃立克体pCS20为靶基因设计特异性引物和探针，建立了TaqMan和Eva Green荧光定量PCR方法，对其反应的特异性、敏感性和重复性进行了分析，并与OIE推荐的套式PCR方法一起对临床样品进行检测。结果显示，本方法特异性强，与牛巴贝斯虫、牛双芽巴贝斯虫、环形泰勒虫、犬埃立克体、牛埃立克体、马埃立克体和立氏埃立克体无交叉反应；TaqMan和Eva Green荧光定量PCR对pCS20质粒标准品的最低检测限分别为17.4拷贝·μL-1和1.74拷贝·μL-1，标准曲线相关系数大于0.99，组内和组间CV均小于1.5%。对420只钝眼蜱样本的检测显示，TaqMan和Eva Green荧光定量PCR的检出率分别为25.48%和29.29%，与套式PCR检测方法相比，敏感性更高。本研究为反刍动物埃立克体的检测和流行病学调查提供了一种快速、准确的检测方法。

来源：2021年第7期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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