畜牧兽医学报

作者：阿比克哈莫, 余忠华, 景志忠, 汤承

单位：1. 中国农业科学院兰州兽医研究所 家畜疫病病原生物学国家重点实验室 农业部兽医公共卫生重点实验室, 兰州 730046;2. 阿坝藏族羌族自治州动物科学技术研究所, 红原 624400;3. 西南民族大学畜牧兽医学院, 成都 610041

关键词：山羊嵴病毒,实时荧光定量PCR方法,山羊,腹泻

基金：“十三五”国家重点研发计划（2016YFD0500907）；西南民族大学新发动物疫病创新团队（2020 NTD02）；动物医学四川省高等学校重点实验室平台项目（2020PTJS29001）

山羊嵴病毒（caprine kobuvirus，CKoV）是国内山羊新发病毒，本试验目的是建立检测CKoV的实时荧光定量PCR方法，并对西南三省腹泻山羊粪样进行该病毒的检测。选择CKoV最保守的3D基因序列，设计3D基因引物，初步设计实时荧光定量PCR，经优化反应条件和反应体系，成功建立了检测CKoV的TB Green染料法实时荧光定量PCR方法。该方法在病毒浓度2.23×102～2.23×108copies·μL-1范围内线性关系良好，相关系数为0.999 2，扩增效率为110%；此方法具有良好的特异性和稳定性，最低检测限为2.23×101copies·μL-1。采用所建立的方法对2020年1—4月采集自四川、云南和重庆的共15个场79份山羊腹泻粪样本进行检测，结果CKoV的平均检出率为25.3%，场阳性率为53.3%。并且本试验获得了13个完整的CKoV 3D基因，遗传进化分析表明这13个3D基因具有独特的进化趋势。本研究为CKoV的分子检测提供了一种新的技术手段和基础流行病学数据。

来源：2021年第5期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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