国内刊号:11-1985/S
国际刊号:0366-6964
发布日期:
作者:李昕, 孙燕燕, 林密, 陈夏辉, 李峰松, 包艳芳, 杨光, 蒋韬
单位:中国农业科学院兰州兽医研究所, 兰州 730046
关键词:口蹄疫病毒,胶体金免疫层析,定量检测,146S
基金:国家重点研发计划(2016YFD0500702-2);国家自然科学基金(31772717)
旨在建立口蹄疫病毒(foot-and-mouth disease virus,FMDV)抗原血清型的快速分型和定量的检测方法,利用双抗体夹心法,将口蹄疫病毒的兔抗及豚鼠抗体作为标记胶体金与NC膜检测带的原料,分别制备出检测O、A、Asia 1血清型的3种层析试纸卡。通过对标定的抗原标准品146S检测,拟合出定量标准曲线。免疫层析方法的质量验证通过特异性、敏感性、重复性及与蔗糖密度梯度法(sucrose density gradient,SDG)的相关性进行评价。结果显示:建立的快速定量检测方法,3种血清型口蹄疫病毒间无交叉反应,同时与其他非口蹄疫病毒,如塞内卡病毒A型(SVA)、猪水疱病病毒(SVDV)、猪水疱性口炎病毒(VSV)无非特异反应;敏感性研究,对O、A、Asia 1型病毒的最低检出量分别为0.567、0.693、0.219 μg·mL-1,拟合的3条标准曲线的线性相关系数R2>0.97,新建立方法与蔗糖密度梯度法检测结果的相关系数均>0.9,3种层析试纸卡的变异系数均小于10%。综上表明,建立的口蹄疫O、A、Asia1型病毒胶体金免疫层析定量检测试纸卡方法,可以用于口蹄疫病毒抗原快速鉴别、血清分型与146S定量检测。
来源:2021年第4期
《畜牧兽医学报》期刊编辑部