畜牧兽医学报

作者：王配, 王丽娜, 霍海龙, 张霞, 赵筱, 王雪飞, 霍金龙

单位：1. 云南农业大学动物科学技术学院, 昆明 650201;2. 云南农业职业技术学院, 昆明 650212

关键词：版纳微型猪近交系,类无精症缺失基因(DAZL),基因克隆,cDNA末端快速克隆(RACE),组织表达,亚细胞定位

基金：国家自然科学基金（32060733；31660637；31460580；31660650）；云南省应用基础研究计划面上项目（2019FB039）

旨在获得猪类无精症缺失基因DAZL cDNA全长序列，阐明该基因的序列、mRNA组织表达模式、蛋白质结构特征及亚细胞定位情况。本研究以版纳微型猪近交系（Banna mini-pig inbred line，BMI）10月龄成年公猪为研究对象，屠宰收集组织样，利用RACE和RT-PCR技术获得DAZL基因cDNA全长序列；使用实时荧光定量PCR （qPCR）技术检测其mRNA多组织表达谱；在线分析蛋白质的结构特点和保守结构域；用体外细胞转染技术鉴定其在ST猪睾丸细胞中的定位。结果表明，BMI DAZL cDNA全长2 985 bp （KU705632），包含888 bp的CDS区，编码295个氨基酸（AOC89050）；该基因位于猪13号染色体，含11个外显子。qPCR结果显示，DAZL mRNA在睾丸中特异高表达。生物信息学分析表明，猪DAZL蛋白含有哺乳动物RMP和DAZ同源区，无规则卷曲在二级结构中超过50%。进化分析表明，BMI DAZL氨基酸序列高度保守，与牛科的亲缘关系最为接近。pEGFP-C1-DAZL转染ST细胞后的荧光共定位结果显示，DAZL蛋白主要分布在细胞核中。本研究分别从DNA、mRNA和蛋白质层面阐明了BMI DAZL基因的序列特征、表达、蛋白质结构和定位，为进一步研究DAZL在BMI精子发生方面的功能奠定基础。

来源：2021年第3期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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