畜牧兽医学报

作者：宋祥军, 沈啸, 蒋胡艳, 陈哲, 刘华, 邵颖, 涂健, 祁克宗

单位：1. 兽医病理生物学与疫病防控安徽省重点实验室, 合肥 230036;2. 安徽省动物疫病预防与控制中心, 合肥 230091

关键词：禽致病性大肠杆菌,APEC,hcp2b,气管黏膜细胞,转录组

基金：国家青年科学基金项目（31802161）

T6SS （type VI secretion system）是革兰阴性菌中常见的一种分泌系统，其效应蛋白Hcp2b作用机制迄今仍未明晰。本研究以禽致病性大肠杆菌（avian pathogenic Escherichia coli，APEC） Hcp2b蛋白为研究主体，旨在探究Hcp2b蛋白在APEC感染鸡气管黏膜过程中发挥的作用及机制。采用Red重组方法以质粒pKD3为模板构建hcp2b缺失株，pSTV-28质粒连接hcp2b目的片段构建重组载体，导入感受态Δhcp2b菌株构建回复株，并对Δhcp2b菌株的生长曲线进行测定。7日龄雏鸡气管感染hcp2b缺失株及野生株，感染后12、24 h收集鸡气管黏膜细胞进行转录组学测序及生物信息学分析。结果表明，hcp2b缺失株及回复株构建成功，hcp2b基因缺失对菌株的生长性能无影响。hcp2b基因缺失株感染气管黏膜后，mRNA的表达谱发生变化，感染后12 h，有144个基因表达量发生变化（上调差异基因87个，下调57个）；感染后24 h，有135个基因表达量发生变化（上调差异基因79个，下调56个）。生物信息学分析发现差异基因富集在Cytokine-cytokine receptor interaction、Protein processing in endoplasmic reticulum等信号通路。hcp2b基因缺失未影响APEC的生长特性，hcp2b基因缺失后影响雏鸡气管黏膜Cytokine-cytokine receptor interaction通路基因mRNA转录水平的变化，IL-1β、IL-12b的表达均上调。该结果为APEC的致病机制研究提供了理论依据。

来源：2021年第3期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

查看畜牧兽医学报杂志2021年第3期