畜牧兽医学报

作者：熊显荣, 张雁, 熊燕, 闵星宇, 吴锦波, 郝振宇, 张贺, 李键

单位：1. 西南民族大学畜牧兽医学院, 成都 610041;2. 青藏高原动物遗传资源保护与利用国家教育部重点实验室, 成都 610041;3. 四川省阿坝州畜牧科学研究所, 阿坝 623000

关键词：牦牛,流式细胞仪,分选,精子活力,胚胎性别

基金：国家“十三五”重点研发专项（2018YFD0502304）；西南民族大学中央高校基本科研业务费专项资金项目（2020PTJS15005）

旨在探索与优化牦牛精子分选条件，建立高效的牦牛X、Y精子分选技术体系。本研究制备了牦牛精液细胞悬液，采用不同量的DNA染料Hoechst33342和诱惑红共孵育精子细胞。利用流式细胞仪分选牦牛X、Y精子，通过比较分选效率、分选后精子活力及发育潜能，优化分选条件。运用RT-PCR检测分选精子的纯度，利用精子分析系统检测分选后精子的活力。将分选后的精子与体外成熟的卵母细胞进行体外受精，统计分选后精子的发育潜力，并采用SRY片段的PCR法检测早期胚胎的性别。结果显示，10 μL Hoechst33342染色40 min后的分选效果最佳，其分选产物的准确度和分选效率显著优于其他组，分选后的X、Y精子活力与20 μL Hoechest33342染色20 min组相当，显著高于其他组（P0.05），但能显著提高分选后精子的活力（P0.05），且胚胎性别比例与分选后精子纯度吻合。综上，本研究建立并优化了流式细胞仪分选牦牛X、Y精子的方法，添加诱惑红有助于改善分选后牦牛精子的活力，为后期牦牛性控精液的制备及生产奠定了基础。

来源：2021年第2期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

查看畜牧兽医学报杂志2021年第2期