畜牧兽医学报

作者：洪磊, 陈祥, 唐文, 周志楠, 段志强, 赵佳福

单位：1. 贵州大学 高原山地动物遗传育种与繁殖教育部重点试验室, 贵州省动物遗传育种与 繁殖重点试验室, 贵阳 550025;2. 贵州大学动物科学学院, 贵阳 550025

关键词：黔北麻羊,SRD5A2基因,RNA干扰,卵巢颗粒细胞,产羔性状

基金：国家重点研发计划项目（2018YFD0502005）；国家自然科学基金（31760652）；贵州省优秀青年科技人才项目（〔2017〕5624）

旨在探究SRD5A2基因对山羊产羔性状相关基因表达的影响。本研究选择健康的（2~3岁）黔北麻羊经产母羊3只，体重约32 kg，采集卵巢组织并成功培养卵巢颗粒细胞。通过在线软件设计SRD5A2基因的4对siRNA干扰序列和1对阴性对照序列，连接pGPH1/GFP/Neo载体后，将构建成功的干扰载体转染至黔北麻羊卵巢颗粒细胞。利用qRT-PCR方法筛选出干扰效率最佳的载体，检测其对SRD5A2基因表达的影响。运用qRT-PCR检测沉默SRD5A2基因对山羊产羔性状相关基因骨形态发生蛋白15（BMP15）、生长分化因子9（GDF9）、骨形态发生蛋白1B（BMPR-1B）和卵泡刺激素β亚基（FSHβ）表达的影响。结果表明，本试验在培养黔北麻羊卵巢颗粒细胞的基础上，成功构建了黔北麻羊SRD5A2基因的干扰载体，并筛选出shRNA-SRD5A2-1干扰效果最佳（P<0.01）；抑制SRD5A2基因表达后，qRT-PCR检测产羔性状相关基因BMP15、BMPR-1B、GDF9和FSHβ的表达量均显著降低，BMP15的表达量极显著低于shRNA-NC对照组（P<0.01），BMPR-1B、GDF9和FSHβ的表达量显著低于shRNA-NC对照组（P<0.05）。本研究成功构建了SRD5A2基因干扰载体并转染至卵巢颗粒细胞，发现体外沉默SRD5A2基因可抑制产羔性状相关基因的表达，提示SRD5A2基因与黔北麻羊产羔性状密切相关，本试验结果为进一步研究SRD5A2基因对黔北麻羊产羔性状的调控机制提供了基础。

来源：2020年第12期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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