畜牧兽医学报

作者：梅力, 王英超, 吴迪, 李月, 宋彦军, 韦海涛, 王林, 高晓龙, 冯小宇

单位：1. 北京市动物疫病预防控制中心, 北京 102629;2. 北京市兽药监察所, 北京 102629

关键词：新城疫病毒,数字PCR,检测方法

基金：北京市科委重大专项首都食品质量安全保障课题（Z171100001317013）

本研究旨在构建一种新城疫病毒（Newcastle disease virus，NDV）的微滴式数字PCR方法（droplet digital PCR，ddPCR）。以NDV F基因为靶基因，选取保守区域设计引物和探针，构建了NDV ddPCR。对ddPCR反应引物和探针浓度、退火温度进行了优化，并对该方法的灵敏度、特异性和重复性进行测定。试验结果表明，ddPCR的最佳引物和探针浓度分别为900和250 nmol·L-1，最佳的退火温度为55℃。ddPCR的线性良好，最低检测下限为1.8 copies·μL-1，与禽传染性支气管炎病毒等其他6种病毒无交叉反应，样本重复的变异系数为2.4%。结果提示，本研究建立的ddPCR方法灵敏度高、特异性强，可对新城疫病毒感染的临床样品进行定量检测。

来源：2020年第12期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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