畜牧兽医学报

作者：张耀东, 朱红, AFAYIBO Dossêh Jean Apôtre, 王瑶, 易正飞, 信素华, 陶程琳, 李涛, 祁晶晶, 田明星, 丁铲, 于圣青, 王少辉

单位：中国农业科学院上海兽医研究所, 上海 200241

关键词：耐药基因,多重PCR,检测

基金：国家重点研发计划项目（2016YFD0500800；2018YFE0102200）；上海浦江人才计划（2019PJD057）；兵团财政科技计划项目（2020AB025）；中央级公益性科研院所基本科研业务费（2020JB03）

本研究旨在建立β-内酰胺类、四环素类、氨基苷类、酰胺醇类、磺胺类抗菌药物耐药基因的多重PCR检测方法，用于耐药基因的快速检测。根据GenBank公布的上述5类抗菌药物的耐药基因序列，设计17对特异性引物。通过优化PCR体系和反应程序，建立4组耐药基因（cat+floR+tetB+tetC；dfrA12+sul2+sul1+blaCTX-M+balTEM-1；aac3+aph3+aadA1+strB；tetA+cmlA+strA+sul3）的多重PCR反应体系。然后，检测多重PCR方法的特异性和敏感性。利用建立的多重PCR方法检测42株禽致病性大肠杆菌的耐药基因，同时，检测其耐药性，比较分析耐药基因和耐药表型之间的相关性。结果显示，建立的4组多重PCR体系可有效扩增出17个耐药基因片段，测序结果表明特异性较好。敏感性结果表明，4组多重PCR体系的菌液敏感性分别为103、104、104和105CFU。禽致病性大肠杆菌分离株的耐药基因多重PCR和单重PCR检测结果一致，其携带的耐药基因和耐药表型的符合率为92.86%。本研究建立的耐药基因多重PCR方法能简便、快速地检测常见的耐药基因，可用于耐药基因的传播、流行调查。

来源：2020年第12期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

查看畜牧兽医学报杂志2020年第12期