畜牧兽医学报

作者：叶华琼, 安翠平, 张凯艺, 谢宁, 毕延震, 杨述林, 李升和

单位：1. 安徽科技学院动物科学学院, 滁州 233100;2. 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所, 北京 100193;3. 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所, 武汉 430064

关键词：葡萄糖依赖性促胰岛素多肽受体,T细胞因子4,Akt信号通路,Min6细胞

基金：转基因生物新品种培育重大专项（2016ZX08010-003）；国家自然科学基金（81770832；31672502）；中国农业科学院科技创新工程（ASTIP-IAS05）；安徽省科技重大专项（201903a06020002）

旨在从GIP/GIPR下游的Akt和PKA信号通路中筛选出调控GIPR表达的调控因子，并解析GIPR的表达调控机制。本研究以小鼠胰岛瘤细胞系Min6为试验材料，在Akt、PKA信号通路阻断的条件下，通过Western blot筛选出与GIPR表达相关的转录因子T细胞因子4（TCF4）；利用双荧光素酶报告系统确定TCF4对GIPR表达调控的影响，再通过敲除或过表达TCF4进一步验证两者之间的调控关系；采用CCK8法检测TCF4介导的促增殖作用，ELISA检测胰岛素分泌能力。结果显示，GIP可激活Akt磷酸化，并促进GIPR表达；在GIP激活及Akt、PKA信号通路阻断时，GIPR蛋白表达趋势与TCF4始终一致；TCF4可与GIPR核心启动子区结合，进而调控其表达；TCF4过表达时，GIPR的mRNA和蛋白表达上调，并促进β细胞增殖及胰岛素分泌；干扰TCF4显著降低GIP作用下GIPR的mRNA和蛋白表达，抑制β细胞增殖。综上，GIP结合GIPR后，经Akt信号通路上调TCF4进而增强GIPR表达，形成正反馈加强GIP信号，提高β细胞增殖和胰岛素分泌的功能，维持血糖稳态。因此，在胰岛素抵抗阻断Akt及上游信号通路时，经转录因子TCF4增强GIPR表达可作为改善胰岛β细胞功能障碍的靶点。

来源：2020年第9期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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