畜牧兽医学报

作者：郭健康, 樊自尧, 牛鹏霞, 刘志国, 牟玉莲, 张明睿, 李奎, 王冰源

单位：1. 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所, 北京 100193;2. 中国科学院微生物研究所 微生物资源前期开发国家重点实验室, 北京 100101

关键词：胰岛素降解酶(Ide),猪,成肌细胞,增殖和分化,AKT

基金：国家自然科学基金（31702083）；中央级公益性科研院所基本科研业务费项目（2020-YWF-YB-06；2017ywf-zd-9）

旨在了解胰岛素降解酶（insulin-degrading enzyme，Ide）在猪不同组织中的表达情况，及其在C2C12成肌细胞增殖和分化中的作用。本研究利用RT-PCR和Western blotting技术检测了Ide在8月龄雄性小型猪不同组织中的表达；利用siRNA技术干扰Ide表达，检测了Ide在C2C12成肌细胞增殖、凋亡和分化中的作用，试验分为Ide-siRNA处理组和NC-siRNA（negative control）对照组，每组3个重复。结果显示，Ide在猪的不同组织（包括大脑、股四头肌、股二头肌、背最长肌、心、肝、脾、肺、肾和睾丸）中广泛表达，其中，在股四头肌、肾和睾丸中表达量相对更高。Ide-siRNA转染成肌细胞48 h后，Ide表达量极显著下降（P<0.001）。CCK-8检测显示，干扰Ide表达促进了成肌细胞的增殖，细胞周期相关基因表达也显著升高，同时发现干扰Ide表达未引起成肌细胞凋亡。利用2%马血清诱导成肌细胞分化的同时转染Ide-siRNA以干扰其表达，在分化的第2和5天发现，与对照组相比，分化相关基因Myog、Myhc等在干扰组中的表达均显著下降，提示成肌细胞的分化受到了抑制。进一步的研究还发现，在分化的第5天，Akt2和磷酸化的AKT（P-AKT）表达量下降。综上，Ide在猪的不同组织中广泛表达，以肌肉、肾和睾丸中表达量更高。干扰Ide表达促进C2C12成肌细胞的增殖，分化时干扰Ide表达则通过Akt2/P-Akt/Myog途径抑制C2C12成肌细胞的分化。

来源：2020年第8期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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