畜牧兽医学报

作者：杨森, 滕蔓, 刘金玲, 周子誉, 郑鹿平, 楚钰淑, 丁轲, 余祖华, 罗俊

单位：1. 河南科技大学动物科技学院, 动物疫病与公共卫生重点实验室, 洛阳 471003;2. 河南省农业科学院动物免疫学重点实验室, 农业部动物免疫学重点实验室, 河南省动物免疫学重点实验室, 郑州 450002;3. 河南省农业科学院, 中英禽病国际研究中心, 郑州 450002;4. 河南农业大学牧医工程学院, 郑州 450002

关键词：马立克病,CVI988/Rispens,meq基因,CRISPR/Cas9,基因编辑

基金：国家自然科学基金（U1604232）；中原千人计划-中原基础研究领军人才；河南省重点研发与推广专项（192102110072）；河南省农业科学院杰出青年科技基金（2019JQ01）；河南省农业科学院科研发展专项资金（2019CY012）

meq是鸡马立克病病毒（MDV）最重要的致瘤基因，在马立克病（MD）肿瘤发生中发挥关键作用。同时，它在疫苗株和强毒株之间具有明显的序列差异性。本文利用CRISPR/Cas9基因编辑技术，以MDV疫苗株CVI988/Rispens meq基因为靶点，设计合成gRNA，克隆构建pX459-gRNA质粒，转染CEF并感染CVI988/Rispens，然后对meq基因编辑的病毒噬斑进行克隆纯化，经过PCR扩增、测序分析及IFA鉴定，成功构建1株meq基因编辑的缺失毒株CVI988Δmeq-C7，为后续筛选和鉴定抗MD疫苗株MEQ单抗及鉴别诊断研究奠定了基础。

来源：2020年第8期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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