畜牧兽医学报

作者：师志海, 王文佳, 兰亚莉, 张彬, 孟红丽, 王亚州, 滑留帅, 徐照学

单位：1. 河南省农业科学院 畜牧兽医研究所, 郑州 450002;2. 河南牧业经济学院动物医药学院, 郑州 450046;3. 河南省畜禽繁育与营养调控重点实验室, 郑州 450002

关键词：牛诺如病毒,实时荧光定量PCR,犊牛腹泻,检测

基金：河南省重点研发与推广专项（192102110074）；国家肉牛牦牛产业技术体系（CARS-37）；国家重点研发计划（2018YFD051700）

牛诺如病毒（BNoV）是国内新发的犊牛腹泻病原，笔者拟建立检测BNoV的Real-time PCR方法。根据BNoV流行株的RNA聚合酶（RdRp）基因序列设计引物，通过优化反应条件和体系，成功建立基于EvaGreen检测BNoV的Real-time PCR方法。该检测方法的Ct值与标准品模板在2.24×102~2.24×108拷贝·μL-1线性关系良好，相关系数R2=0.997，扩增效率为98.44%；该方法可特异性检出BNoV，对其他犊牛腹泻相关病原呈阴性；最低检测限为22.4拷贝·μL-1；批间和批内的变异系数均小于2%，重复性好。对2017年9月-2019年5月采自河南省的221份犊牛腹泻样本中BNoV的检出率为11.31%（25/221），采样场阳性率为92.86%（13/14）。本试验所建方法灵敏度高、特异性强、稳定性好，为BNoV的检测和流行病学调查提供了有力手段。

来源：2020年第7期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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