畜牧兽医学报

作者：李莹, 王艳, 王劼, 何静怡, 罗成龙, 瞿浩

单位：广东省农业科学院动物科学研究所, 畜禽育种国家重点实验室, 广东省畜禽育种与营养研究重点实验室, 广东省动物育种与营养公共实验室, 广州 510640

关键词：鸡胚,外泌体,分离,功能研究

基金：广东省自然科学基金项目（2018A030313692）；广东省科技计划项目（2017B020206003；2017B020232003）；广东省省级现代农业科技创新联盟建设共性关键技术创新团队项目（2019KJ106）；国家肉鸡产业技术体系专项（CARS-41）

旨在基于鸡胚外泌体及所含有的miRNAs解析其产生生理功效的活性物质基础及作用机制。本研究收集13胚龄惠阳胡须鸡胚蛋18枚（3组，每组6枚），采用酶消化、蔗糖密度梯度和差速超速离心等方法分离鸡胚组织来源的外泌体，经透射电镜、纳米流式和标志蛋白流式检测等方法鉴定其特征。利用高通量测序方法研究外泌体样本中miRNAs表达谱，对各样本top 10且共表达的miRNAs进行靶基因预测与功能分析。结果表明，分别获得了3个浮力密度范围（S1：1.13 g·mL-1、S2：1.21 g·mL-1和S3：1.32 g·mL-1）具有外泌体典型特征的胞外囊泡；与miRBase V21进行比对发现，S1、S2和S3样品中分别含有675、661和845个已知的miRNAs，这些miRNAs中有488个（52.6%）三者共有，包括了广泛参与细胞增殖、分化和免疫应答等过程的功能性miRNAs。TargetScan 7.2和miRDB预测得到3个样本中top 10且共表达的56个miRNAs的靶基因，获得的3 650个靶基因经DAVID分析，显著富集了24个与机体生长、发育、免疫等有关的生物学通路（P<0.05），包括MAPK信号通路、mTOR信号通路、Notch信号通路、Wnt信号通路和GnRH信号通路等。本研究建立了鸡胚组织中有效分离外泌体的方法，发现鸡胚组织来源的外泌体miRNAs会影响机体生长发育和免疫调节有关的生物学通路。

来源：2020年第6期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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