畜牧兽医学报

作者：王强, 潘洋洋, 乔利英, 刘建华, 赵弼时, 刘旭莹, 王凤, 梁煜, 刘文忠

单位：山西农业大学动物科技学院, 太谷 030801

关键词：miR-33a,Lipin1,IRS2,绵羊,脂肪细胞分化

基金：国家自然科学基金（31972560）；山西省“1331工程”重点学科建设计划（J201811301）

旨在揭示miR-33a在绵羊前体脂肪细胞分化中的生物学功能。本研究以15日龄雄性绵羊背部皮下前体脂肪细胞为试验材料，所有的试验均设立3个重复；利用生物信息学软件预测miR-33a的靶基因，并通过双荧光素酶报告试验对预测的潜在靶基因进行验证；用qPCR和Western blotting分别检测miR-33a、Lipin1和IRS2及其编码蛋白的表达，以揭示miR-33a与其靶基因在绵羊前体脂肪细胞分化中的表达规律；慢病毒介导实现miR-33a的过表达和干扰后，检测Lipin1、IRS2和成脂标志基因的表达，并用油红O染色检测脂滴沉积能力，以解析miR-33a对其靶基因的调节机制。生物信息学分析发现，miR-33a与Lipin1和IRS2 3'-UTR都存在结合位点，miR-33a显著下调Lipin1和IRS2野生型双荧光质粒的相对荧光活性（P<0.05）；在绵羊前体脂肪细胞分化中，miR-33a与Lipin1和IRS2的表达趋势相反；过表达miR-33a后，显著下调了Lipin1（P<0.01）和IRS2（P<0.05）及其编码蛋白以及成脂标志基因的表达；干扰miR-33a后，这些基因和蛋白的表达则显著上调；过表达miR-33a减少了脂滴沉积，干扰miR-33a促进了脂滴沉积。在绵羊前体脂肪细胞分化中，miR-33a与Lipin1和IRS2的表达呈负相关。miR-33a靶向Lipin1和IRS2的3'-UTR抑制绵羊前体脂肪细胞分化和脂滴沉积。

来源：2020年第4期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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