畜牧兽医学报

作者：易华山, 马鲜平, 赵瑶, 朱飘, 刘骁, 邓博远, 吴昕炜, 朱丹, 崔燕

单位：1. 西南大学动物科学学院, 重庆 402460;2. 重庆市兽医科学工程研究中心, 重庆 402460;3. 重庆市畜牧科学院, 重庆 402460;4. 甘肃农业大学动物医学院, 兰州 730070

关键词：荣昌猪,BMP15,SMAD,卵母细胞,TGF-β

基金：中央高校基本科研业务专项基金（XDJK2018C059；XDJK2018C060）；西南大学荣昌校区青年科学基金（20700949）；重庆市基础研究与前沿探索专项项目基金（cstc2018jcyjAX0615）

本研究旨在阐明荣昌猪BMP15基因在荣昌猪性成熟前不同发育期的表达特性及其与SMADs信号相关基因的表达关系。采集1月龄、3月龄及5月龄荣昌猪卵巢组织，利用qRT-PCR及石蜡切片免疫荧光染色法分析荣昌猪不同月龄卵巢组织内BMP15基因表达及细胞定位特征；利用5月龄卵巢活组织添加重组人BMP15蛋白及TGF-β受体抑制剂（LY215799和LY2109761），应用qRT-PCR及Western blot方法分析BMP15及SMADs信号通路相关基因SMAD2、SMAD3、SMAD4、SMAD7、TGF-β1、TGF-β2、TGF-β3、TGF-β RⅠ和TGF-β RⅡ表达特征及BMP15/SMADs信号通路。结果表明：从1月龄至5月龄，随着荣昌猪生长发育，卵巢组织内BMP15基因mRNA表达量呈上调表达（P<0.05）；石蜡切片免疫荧光试验表明，5月龄卵巢组织卵母细胞周围颗粒细胞内存在BMP15蛋白荧光信号；从3月龄至5月龄的卵巢组织内BMP15、SMAD4、TGF-β1及TGF-β RⅡ基因在mRNA水平呈上调表达（P<0.05），而SMAD2、TGF-β2及TGF-β RⅠ呈下调表达（P<0.05）；通过5月龄卵巢活组织添加重组人BMP15蛋白、TGF-β RⅠ/Ⅱ及TGF-β RⅠ受体抑制剂培养，发现TGF-β RⅠ/Ⅱ抑制剂（LY2109761）明显抑制TGF-β RⅡ受体蛋白的表达，TGF-β RⅠ抑制剂（LY2157299）不能抑制TGF-β RⅡ受体蛋白的表达。上述结果表明，荣昌猪BMP15基因在荣昌猪性成熟前的卵巢组织内呈上调表达，SMAD4、TGF-β1及TGF-β RⅡ也呈上调表达。本试验研究表明BMP15基因通过TGF-β RⅡ介导SMAD4信号分子调控下游基因的表达，为进一步研究荣昌猪BMP15基因在卵泡发育中发挥的作用提供理论依据。

来源：2020年第4期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

查看畜牧兽医学报杂志2020年第4期