畜牧兽医学报

作者：宋高媛, 杨帆, 郝荣增, 李郁, 郑海学

单位：1. 安徽农业大学动物科技学院, 合肥 230036;2. 中国农业科学院兰州兽医研究所 家畜疫病病原生物学国家重点实验室 国家口蹄疫参考实验室, 兰州 730046

关键词：塞内卡病毒A,口蹄疫病毒,抗原表位,嵌合病毒

基金：国家重点研发计划项目（2017YFD0501103）；甘肃省科技重大专项（19ZDNA001）

塞内卡病毒A（SVA）与口蹄疫病毒（FMDV）引起猪的临床症状难以区分，并且以SVA作为载体插入FMDV抗原表位外源基因的研究，目前还没有报道。为了构建一种嵌合FMDV抗原表位的重组SVA毒株并进行鉴定，本研究利用基因克隆技术将O型FMDV的B细胞表位与白蛋白信号肽（human albumin signal peptide，HAS）基因串联插入到SVA基因组中，成功构建了重组质粒，转染细胞后拯救出重组病毒rSVA-HAS-OB。结果显示：RT-PCR扩增与基因测序结果表明目的基因正确插入；细胞间接免疫荧光和Western blot鉴定了嵌合抗原蛋白的有效表达；遗传稳定性分析表明重组病毒在25代次的传代过程中仍稳定存在B细胞表位；病毒蚀斑表型和一步生长曲线结果表明，重组病毒与亲本毒株具有相似的增殖特性。本研究成功构建并拯救出能够表达FMDV抗原表位的重组SVA毒株，为以SVA为基础的嵌合病毒及疫苗的研究提供了理论和实验基础。

来源：2020年第3期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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