畜牧兽医学报

作者：包黎娟, 刘育含, 马毅, 安小鹏, 张月, 张梦, 王建刚, 堵斌, 李广, 曹斌云

单位：1. 西北农林科技大学动物科技学院, 杨凌 712100;2. 天津市畜牧兽医研究所, 天津 300381;3. 陕西佰傲再生医学有限公司, 西安 710000

关键词：miR-92a,奶山羊,乳腺上皮细胞,转录组测序

基金：陕西省重点研发计划（2018ZDCXL-NY-01-03）

miRNAs是对哺乳动物乳腺组织发育及泌乳机能进行调控的重要因子。本研究依据已有的关中奶山羊乳腺组织miRNA表达谱，选择不同泌乳时期差异表达的miR-92a为研究对象，探究miR-92a对山羊乳腺上皮细胞（GMEC）增殖及凋亡的调控作用，并挖掘其潜在的调控基因。采用荧光定量PCR、MTT检测、EdU检测及流式细胞术，检测miR-92a在不同泌乳时期乳腺组织的表达情况，并在细胞水平检测miR-92a对乳腺上皮细胞增殖、凋亡及细胞周期的调控作用。利用RNA-seq技术，分析过表达miR-92a乳腺上皮细胞中的差异表达基因。qRT-PCR结果显示，miR-92a在奶山羊泌乳初期乳腺组织中表达量极显著高于泌乳中期（P<0.01），表明miR-92a可能对奶山羊泌乳性状有重要的调控作用。GMEC过表达miR-92a后，试验结果显示：与NC对照组比较，miR-92a过表达组的EdU阳性细胞数极显著减少（P<0.01），S期的细胞数显著下降、G1期的细胞数显著增加，同时miR-92a组的凋亡细胞数目显著增加（P<0.05）。采用RNA-seq，构建了miR-92a过表达mRNA文库，发现下调基因54个，上调基因160个。GO terms及KEGG通路分析显示差异表达基因调控乳腺上皮细胞多种生物学功能。以上结果表明miR-92a促进GMEC凋亡、抑制其增殖，测序结果进一步证明miR-92a对奶山羊乳腺发育及泌乳性能具有潜在的调控作用。

来源：2020年第1期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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