畜牧兽医学报

作者：廖政, 嵇辛勤, 李基棕, 肖芳, 刘茂军, 毛立, 李文良, 孙敏

单位：1. 贵州大学动物科学学院, 贵阳 550025;2. 江苏省农业科学院兽医研究所, 农业部兽用生物制品工程技术重点实验室, 南京 210014

关键词：bta-miR-677,Ⅰ型干扰素,干扰素刺激基因,线粒体抗病毒信号蛋白

基金：国家自然科学基金（31702272；31802196）；江苏省自然科学基金（BK2017059）

旨在探究bta-miR-677调控Ⅰ型干扰素（IFN）表达的分子机制。将bta-miR-677转染MDBK细胞，检测Ⅰ型IFN和干扰素刺激基因（ISGs）的转录水平；随后通过TargetScan预测bta-miR-677的靶基因，双荧光素酶报告基因系统、qRT-PCR和Western blot验证bta-miR-677的靶基因；利用siRNA敲减验证靶基因对Ⅰ型IFN转录的影响。结果显示，过表达bta-miR-677组IFN-α/β的转录水平高于对照组2~4倍（P<0.001），随后检测到6种ISGs（IFI6、OAS1Y、OAS1Z、RSAD2、MX1和MX2）转录量上调2~16倍（P<0.01或P<0.001）；反之，抑制表达bta-miR-677组IFN-α/β转录量下调（P<0.01或P<0.05），同时IFI6、OAS1Y、OAS1Z、RSAD2、MX1和MX2转录量下调（P<0.05或P<0.01）。经TargetScan预测和双荧光素酶报告基因系统、qRT-PCR和Western blot检测显示，bta-miR-677可靶向结合线粒体抗病毒信号蛋白（MAVS）的3'-UTR，抑制MAVS蛋白的表达；MAVS基因敲减后发现，IFN-α、IFN-β和6种ISGs转录量上调。研究结果表明，bta-miR-677通过靶向MAVS上调IFN-α/β转录水平，进而提高ISGs的表达量，为基于bta-miR-677研制抗病毒药物提供了重要资料。

来源：2020年第1期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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