畜牧兽医学报

作者：王斌, 佟连鑫, 秦文昌, 李键, 殷实

单位：1. 西南民族大学生命科学与技术学院, 成都 610041;2. 青藏高原动物遗传资源保护与利用教育部重点实验室, 成都 610041;3. 青藏高原动物遗传资源保护与利用四川省重点实验室, 成都 610041;4. 西南民族大学现代生物技术国家民委重点实验室, 成都 610041

关键词：组蛋白去乙酰化,SIRT3,牦牛,组织表达谱,睾丸

基金：中央高校基本科研业务费专项基金项目（2018NQN33）；四川省科技支撑计划（2017NZ0076）；牦牛遗传资源与保护创新团队（13CXTD01）；青藏高原动物遗传资源保护与利用重点实验室资助

旨在克隆牦牛沉默蛋白调节因子3（sirtuin 3，SIRT3）基因，并检测其在牦牛不同组织及不同年龄睾丸中的表达水平，从而为研究SIRT3在牦牛睾丸发育过程中的作用机制提供试验依据。本研究选取胎牛期（5~6个月）、幼年期（1~2岁）、性成熟期（3~5岁）及老年期（7~9岁）健康雄性牦牛共12头（每组各3头），其中来源于同一年龄阶段的3个组织样本视为生物学重复。采集性成熟期牦牛肝、心、肺、脾、脑、肾、肌肉、小肠、睾丸和大肠以及4个时期的睾丸组织。分别提取各组织的总RNA，并利用反转录PCR（reverse transcription PCR，RT-PCR）技术克隆获得牦牛SIRT3基因序列，使用相关生物信息学软件预测其编码蛋白质的结构和功能；通过实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR，qRT-PCR）检测SIRT3 mRNA在牦牛各组织及睾丸4个发育阶段的表达水平。结果表明，SIRT3基因的ORF（open reading frame，开放阅读框）为1 002 bp，编码333个氨基酸，与黄牛和绵羊的同源性分别达到99.9%和96.7%，该基因的mRNA在牦牛的各个组织中广泛表达，在脾、睾丸、肺和肌肉中的表达量较高。随年龄增长SIRT3 mRNA在牦牛睾丸中表达呈现先上升后下降的趋势，其中在性成熟期的表达量最高。本研究为揭示SIRT3在牦牛生长发育，尤其是睾丸发育过程中的调控提供了一定的基础数据。

来源：2019年第12期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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