畜牧兽医学报

作者：李军, 高晶萍, 张雅琪, 罗强, 梁亭, 李珮瑶, 王少华, 张瑞华, 徐明举, 徐彤

单位：1. 河北北方学院预防兽医学重点实验室, 张家口 075000;2. 河北北方学院生命科学研究中心, 张家口 075000;3. 河北北方学院基础医学院, 张家口 075000

基金：国家自然科学基金（31672522；31602030）；河北省教育厅自然科学研究重点课题（ZD2019078）；河北省第二期农业现代化产业体系蛋肉鸡创新团队专项经费（HBCT2018150207）；河北自然科学基金（C2019405060）

旨在探讨瞬时电位受体M2离子通道（TRPM2）在H9N2流感病毒感染小鼠肺微血管内皮细胞（PMVEC）导致线粒体损伤过程中的作用。在已建立TRPM2 shRNA PMVEC的基础上，采用5MOI H9N2猪流感病毒感染细胞，在病毒作用后24和48 h提取各组细胞的线粒体进行蛋白定量，检测各组细胞线粒体超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽（GSH）、一氧化氮合成酶（NOS）、线粒体呼吸链复合物Ⅳ活性和ATP酶水平；利用激光共聚焦显微镜观察线粒体膜电位变化（JC-1染色）及细胞凋亡（Annexin V-FITC/PI双染色法）情况。结果表明：H9N2-SIV感染后TRPM2 shRNA PMVEC内SOD活性、GSH水平和Na+-K+-ATP、线粒体呼吸链复合物Ⅳ活性显著高于对照shRNA PMVEC（P<0.05或P<0.01）；mtNOS活性则极显著低于shRNA PMVEC（P<0.01）。JC-1染色显示TRPM2-siRNA PMVEC线粒体膜电位水平高于对照shRNA PMVEC，但是AnnexinV-FITC/PI染色显示细胞凋亡则低于H9N2感染对照shRNA PMVEC。结果提示：TRPM2基因沉默有效减缓H9N2感染导致NOS产生，显著降低SOD、GSH、线粒体呼吸链复合物Ⅳ、Na+-K+-ATP的消耗以及线粒体膜电位的下降程度，进而有效缓解PMVEC线粒体损伤及细胞凋亡。

来源：2019年第10期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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