畜牧兽医学报

北大核心,CA,JST,CSCD,WJCI

国内刊号:11-1985/S

国际刊号:0366-6964

畜牧兽医学报杂志2019年第10期:发酵饲料中乳酸菌含量检测的EMA-qPCR方法

发布日期:

作者:胡会龙, 魏小兵, 王秋霞, 欧长波, 闫艺婷, 吕玉琼, 刘兴友

单位:1. 河南科技学院动物科技学院, 新乡 453003;2. 畜禽智能化清洁生产河南省工程实验室, 新乡 453003;3. 新乡学院, 新乡 453003

基金:河南省现代农业产业技术体系生猪产业技术创新团队(S2012-06-G02);国家重点研发计划(2016YFD0500702);河南省科技开放合作项目(182106000043)

旨在快速检测发酵饲料中乳酸菌含量,将叠氮溴乙锭(EMA)与q-PCR技术相结合,通过对诸如EMA浓度、曝光时间等影响EMA的因素进行探索,确定EMA的作用条件。在试验条件下用EMA处理已知浓度的乳酸菌菌液,提取乳酸菌DNA,结合q-PCR建立Ct值与乳酸菌含量对数值之间的标准曲线。利用标准曲线,快速计算发酵饲料中的乳酸菌含量。结果表明EMA浓度在3~4 μg·mL-1曝光10 min可有效抑制死菌DNA的扩增,从而消除死菌DNA扩增对Ct值的影响。通过对8份发酵饲料进行检测,其结果与平板计数具有较高的符合度。EMA-qPCR方法可用于快速准确地检测发酵饲料中活的乳酸菌含量。

来源:2019年第10期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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