畜牧兽医学报

作者：王盼举, 樊新丽, 张梦圆, 宋晶晶, 李敏, 吾力江, 巴音查汗

单位：新疆农业大学动物医学学院, 乌鲁木齐 830052

基金：国家自然科学基金地区科学基金项目（31660711）

本研究旨在建立马驽巴贝斯虫抗体的快速、准确检测方法。以纯化的马驽巴贝斯虫Bc48基因片段的原核表达产物免疫6周龄雌性BALB/c小鼠制备单克隆抗体，并利用重组抗原与单克隆抗体建立间接竞争ELISA（CI-ELISA）方法检测马驽巴贝斯虫抗体。结果显示：制备出3株能稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株，命名为1H2、7F4、11F4，通过对CI-ELISA条件筛选得出，抗原最佳包被浓度为0.19 μg·mL-1，单克隆抗体11F4的最佳工作浓度为1：3.2×105，通过检测30份马驽巴贝斯虫阴性血清及20份阳性血清，确定该检测方法临界值为45%；特异性试验发现，该CI-ELISA方法不与感染马泰勒虫病的阳性血清发生反应，具有特异性；用所建立的CI-ELISA检测临床血清90份，与标准c-ELISA试剂盒总符合率为92.2%、阳性符合率92.1%、阴性符合率94.1%。试验结果表明，该CI-ELISA方法特异性强，敏感性高，稳定性和重复性好，操作简便。基于单克隆抗体（11F4）与重组蛋白（HIS-Bc48）所建立的CI-ELISA特异性、重复性好，可为新疆马驽巴贝斯虫的检测、监控提供有效手段。

来源：2019年第9期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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