畜牧兽医学报

作者：凌英会, 朱露, 吴昊, 陈青, 权青, 刘勇, 李文雍, 张运海

单位：1. 安徽农业大学动物科技学院, 合肥 230036;2. 安徽地方畜禽遗传资源保护与生物育种省级实验室, 合肥 230036;3. 阜阳师范学院胚胎发育与生殖调节安徽省重点实验室, 阜阳 236037

关键词：FST基因,卵巢卵泡颗粒细胞,慢病毒载体,shRNA,过表达载体,细胞增殖

基金：国家重点研发计划项目（2018YFD0502001）；国家自然科学基金（31772566）；安徽省重点研发计划项目（1804a07020128）

研究卵泡抑素（FST）对山羊卵巢卵泡颗粒细胞增殖的影响。采集山羊卵巢组织、分离培养原代卵巢卵泡颗粒细胞，RT-PCR克隆山羊FST，设计shRNA片段，构建慢病毒过表达载体和干扰载体，感染原代卵巢卵泡颗粒细胞，qPCR技术检测过表达与干扰的效果，CCK-8检测细胞的增殖效果。结果显示：分离培养的山羊卵巢卵泡颗粒细胞经促卵泡素受体（FSHR）免疫荧光鉴定，阳性率为95%；慢病毒感染颗粒细胞时荧光蛋白的表达占比80%；qPCR验证FST过表达和干扰慢病毒载体的效果均显著（P<0.05）；过表达FST显著（P<0.05）抑制卵巢卵泡颗粒细胞的增殖，干扰FST显著（P<0.05）促进卵巢卵泡颗粒细胞增殖。笔者分离出山羊卵巢卵泡颗粒细胞，成功构建FST过表达和干扰两种慢病毒载体，感染结果表明FST能够抑制山羊卵巢卵泡颗粒细胞的增殖，为进一步研究FST在哺乳动物卵泡发育调控中的作用及其机制提供了基础资料。

来源：2019年第9期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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