畜牧兽医学报

作者：杨涛, 许厚强, 陈伟, 周迪, 王圆圆, 朱晓锋

单位：1. 贵州大学高原山地动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室, 贵阳 550025;2. 贵州大学贵州省动物遗传育种与繁殖重点实验室, 贵阳 550025;3. 贵州大学动物科学学院, 贵阳 550025;4. 贵州大学生命科学学院, 贵阳 550025

基金：国家科技支撑计划（2015BAD03B02-3）；教育部促美大项目（【2015】2062号）

旨在解析牛MSTN启动子与MEF2C之间的相互调控作用，进一步探讨MSTN基因在肉牛肌肉生长发育方面的调控机制。首先，通过PCR扩增关岭牛MSTN启动子序列2 267 bp和MEF2C基因CDS区1 425 bp。其次，构建pGL3-Basic-MSTN和pcDNA3.1（+）-MEF2C双荧光素酶报告载体，采用脂质体法共转染至小鼠C2C12成肌细胞，24 h后检测其双荧光素酶活性。最后，通过PCR扩增MSTN启动子核心片段MSTN-P1，重新构建以MSTN-P1片段替代（CMV）区的重组表达载体pEGFP-N3-MSTN-P1-MEF2C，将其分别转染至小鼠C2C12成肌细胞和大鼠下颌腺上皮细胞，24 h后观察绿色荧光蛋白发光情况，48 h后提取细胞总RNA，利用qRT-PCR检测MEF2C基因在不同细胞中的表达情况。结果显示，在小鼠C2C12成肌细胞中，共转染pcDNA3.1（+）-MEF2C试验组较pGL3-Basic-MSTN试验组能显著增强MSTN启动子的活性（P<0.05），较pGL3-Basic对照组能极显著增强MSTN启动子的活性（P<0.01）；MSTN启动子核心片段MSTN-P1能驱动MEF2C基因在小鼠C2C12成肌细胞中的表达量极显著上调（P<0.01），且能驱动MEF2C基因在大鼠下颌腺上皮细胞中的表达量显著上调（P<0.05）。结果表明，在转录水平，MSTN启动子与MEF2C可能同时参与了牛肌肉生长和分化的调控。

来源：2019年第8期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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