畜牧兽医学报

北大核心,CA,JST,CSCD,WJCI

国内刊号:11-1985/S

国际刊号:0366-6964

畜牧兽医学报杂志2019年第8期:炭疽杆菌双重荧光定量PCR检测技术的建立和应用

发布日期:

作者:王素华, 帅江冰, 李舟, 袁淑辉, 吴绍强, 吕继洲, 赵治国

单位:1. 温州海关综合技术服务中心, 温州 325027;2. 杭州海关技术中心, 杭州 310016;3. 中国检验检疫科学研究院动物检疫所, 北京 100029;4. 呼和浩特海关技术中心, 呼和浩特 010020

基金:国家质检总局科技计划项目(2017IK098);浙江省重大科技专项重点农业项目(2015C02044)

为快速和准确检测炭疽杆菌,本研究以炭疽杆菌染色体上的BA5345基因和pXO1质粒上的PA基因为靶基因设计特异性引物和探针,建立了炭疽杆菌双重荧光定量PCR检测方法,对其反应的特异性、敏感性和重复性进行了分析,并与常规PCR方法一起对临床样品进行检测。结果显示,所建立方法特异性强,与蜡样芽胞杆菌群中其他芽胞杆菌无交叉反应;对BA5345基因和PA基因的最低检测限分别为8.0和7.8拷贝·μL-1,标准曲线相关系数大于0.99,组内和组间CV均小于1.5%。对35份污染皮毛样品检测显示BA5345基因和PA基因的检出率分别为80.0%和82.9%,与常规PCR检测方法相比,敏感性更高。本研究为炭疽杆菌的检测和流行病学调查提供了一种快速、准确的检测方法。

来源:2019年第8期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

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