畜牧兽医学报

作者：刘宗立, 陈涛, 杨丹丹, 崔景香, 李川皓, 曾勇庆, 陈伟

单位：1. 山东农业大学动物科技学院, 泰安 271018;2. 山东省动物生物工程与疾病防治重点实验室, 泰安 271018;3. 潍坊科技学院, 潍坊 262700

基金：国家自然科学基金（31401055）；山东省现代农业产业技术体系生猪创新团队建设专项（SDAIT-08-02）；山东省“双一流”奖补资金项目（SYL2017YSTD12）；山东省农业良种工程重大课题（2013LZ01-003）；山东农业大学青年科技创新基金

旨在了解猪Nrf2基因的结构和功能，研究Nrf2基因的转录调控机制。本研究选取6头90 kg左右的健康大蒲莲猪为试验动物，采用cDNA末端快速克隆技术（RACE）和染色体步移技术获得大蒲莲猪Nrf2基因完整的cDNA序列和启动子区域，利用生物信息学软件分析Nrf2基因及其启动子区域的生物学特征。结果，Nrf2基因cDNA全长2 358 bp，包括87 bp的5'UTR，495 bp的3'UTR序列，CDS区大小为1 776 bp，编码591个氨基酸。对预测蛋白质序列进行生物信息学分析，蛋白分子量为66.402 7 ku，理论等电点（pI）为4.66，大部分二级结构为α-螺旋。采用染色体步移技术扩增得到5'侧翼序列2 091 bp的片段。Nrf2基因5'侧翼区经预测含有典型的TATA-box，不含CpG岛。构建不同长度启动子片段的pGL3-Basic表达载体，转染293T细胞后经双荧光素酶活性检测，提示在-903~-710 bp区域内可能存在正调控区或增强子，生物信息学预测其中含有多个转录因子结合位点，可能参与Nrf2基因转录调控。本研究成功获得了Nrf2基因完整的cDNA序列和启动子区域，并且发现-903~-710 bp为核心启动子，本研究为猪抗氧化应激的遗传改良提供一定理论基础。

来源：2019年第7期

《畜牧兽医学报》期刊编辑部

查看畜牧兽医学报杂志2019年第7期